公司動(dòng)態(tài)
質(zhì)粒抽提試劑盒操作注意事項(xiàng)
閱讀:5081 發(fā)布時(shí)間:2013-8-22哈靈生物的質(zhì)粒抽提試劑盒的效率以及得率獲得廣大客戶(hù)的*!
我們干的研究工作大部分是基因治療,抽提質(zhì)粒是一件相當(dāng)痛苦的事。因?yàn)?/span>需要做動(dòng)物的體內(nèi)實(shí)驗(yàn),您需要靜脈注射50微克
質(zhì)粒抽提試劑盒的動(dòng)物,三次重復(fù)注射,每次150毫克,如果有60只需要9。如果需要大量抽提質(zhì)粒的實(shí)驗(yàn)人員就清楚這是需要多大的工作量并且需要提出的是靜脈注射動(dòng)物用的質(zhì)粒是需要去內(nèi)毒素的,目前去內(nèi)毒素得率高的非哈靈生物莫屬。
要有高產(chǎn)率高質(zhì)量的質(zhì)粒抽提試劑盒,以下幾個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)要注意:
1. 準(zhǔn)備必要的設(shè)備,根據(jù)哈靈生物的協(xié)議,連接到的廣口瓶,直徑45毫米,這是因?yàn)楸仨毰c瓶可以匹配,操作的真空過(guò)濾這一步可以迅速和容易,減少不必要的麻煩。
2. 高拷貝質(zhì)粒是的,主管細(xì)菌是的高拷貝。作為10大,DH5α稍差。主管細(xì)菌是剛做不久。
3. 每次在600毫升細(xì)菌數(shù)量,LB注意水質(zhì)量一定要好,一定的pH值在7.27.4,搖床轉(zhuǎn)速250轉(zhuǎn)/分,16小時(shí),注意其濃度必須堅(jiān)強(qiáng)。
4. 操作過(guò)程必須與時(shí)間的指示一致,嚴(yán)格操作。要注意一點(diǎn):添加中和在的時(shí)間較短,因此需要真空,快速進(jìn)入下一步。
5.洗脫時(shí)間很長(zhǎng),要有耐心,不要讓臟兮兮的洗脫液停止。
6.異丙醇沉淀DNA離心在20000轉(zhuǎn)離心45分鐘,可以提高20%的產(chǎn)量。
7.是圓底離心管和透明,以免離心破裂,而且操作方便。
8.在一定要提前質(zhì)粒沉淀在棄異丙醇和乙醇一般位置,不誘導(dǎo)質(zhì)粒被遺棄了。
9.溶解DNA注意溶液的體積比在手冊(cè)的說(shuō)明略小,佳二次溶解,然后混合。
相信注意這些細(xì)節(jié)后,你將獲得每一次以上1.5mg質(zhì)粒。