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產品簡介
| 供貨周期 | 現貨 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,制藥 |
|---|
產品介紹
Hieff NGS® dsDNA Methyl Library Prep Kit for Illumina®是針對Illumina®高通量測序平臺開發(fā)的雙鏈DNA甲基化建庫試劑盒。本試劑盒通過連接相應的甲基化接頭，經亞硫酸氫鹽或酶法轉化處理，再經過一步擴增即可構建針對Illumina®平臺測序的甲基化文庫。試劑盒所有組分均通過質量控制和功能驗證，以確保文庫的穩(wěn)定產出，支持多種類型DNA樣本，包括gDNA、cfDNA和FFPE等。本試劑盒推薦的樣本起始量為10 ng-1000 ng DNA，并兼容市面主流的轉化方案。
產品信息
貨號 | 12214ES08 / 12214ES24 / 12214ES96 |
規(guī)格 | 8 T / 24 T / 96 T |
組分信息
組分編號 | 組分名稱 | 12214ES08 | 12214ES24 | 12214ES96 | |
12214-A |
| Endprep Buffer | 56 μL | 168 μL | 672 μL |
12214-B |
| Endprep Enzyme | 24 μL | 72 μL | 288 μL |
12214-C |
| Ligation Enhancer | 240 μL | 720 μL | 3×960 μL |
12214-D |
| Rapid T4 DNA Ligase | 80 μL | 240 μL | 960 μL |
12214-E |
| Methyl Stubby Adapter | 40 μL | 120 μL | 480 μL |
12214-F |
| 2 × Canace® Uracil + PCR Mix 2.0 | 200 μL | 600 μL | 2×1200 μL |
儲存條件
-25~-15℃保存，有效期1年。
使用方法
一、自備材料
純化磁珠：Cat#12601，Hieff NGS® DNA Selection Beads或Cat#A63880，AMPure XP Beads或其他等效產品。
轉化模塊：Cat#12222，Hieff® DNA Bisulfite Conversion Kit；Cat#12223，Hieff® Mag DNA Methylation Bisulfite Kit和酶轉化模塊Cat#12213，Hieff® DNA Mild methyl- Conversion Kit或其他等效產品。
DNA質控：Agilent Technologies 2100 Bioanalyzer或其他等效產品。
其他材料：無水乙醇、滅菌超純水、TE Buffer (10 mM Tris-HCl，pH 8.0-8.5+1 mM EDTA)、低吸附EP管、PCR管、磁
力架、PCR儀等。
二、操作流程
圖1 Hieff NGS® dsDNA Methyl Library Prep Kit for Illumina®
圖2 文庫片段分布示例
注：10 ng cfDNA使用Hieff NGS® dsDNA Methyl Library Prep Kit for Illumina®建庫后的文庫片段分布 (Agilent 2100,DNA 1000 Kit)，其中紅色代表酶轉化方案構建的DNA文庫，PCR擴增循環(huán)數為10；藍色代表重亞硫酸鹽轉化方案構建的DNA文庫，PCR 擴增循環(huán)數為 12。
