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20566ESAnti-HA MagBeads(Anti-HA免疫磁珠)
參考價(jià): 面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 20566ES 產(chǎn)品型號(hào)
  • Yeasen/翌圣生物 品牌
  • 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
  • 上海市 所在地

訪(fǎng)問(wèn)次數(shù):362更新時(shí)間:2025-02-07 13:50:55

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè),制藥
Anti-HA免疫磁珠(Anti-HA MagBeads)是一種聚合物磁性微球,由高質(zhì)量的鼠源 IgG1 單克隆抗體與carboxyl magnetic beads通過(guò)供價(jià)偶聯(lián)制備,本產(chǎn)品具有快速的磁響應(yīng)性,超順磁性、良好的分散性、粒徑均一、極低的非特異結(jié)合和豐富的結(jié)合位點(diǎn)等特點(diǎn),可用于帶有HA標(biāo)簽的蛋白免疫沉淀(IP)。
產(chǎn)品介紹

產(chǎn)品描述

 

Anti-HA免疫磁珠Anti-HA MagBeads)是一種聚合物磁性微球由高質(zhì)量的鼠源 IgG1 單克隆抗體與carboxyl magnetic beads通過(guò)供價(jià)偶聯(lián)制備,本產(chǎn)品具有快速的磁響應(yīng)性,超順磁性、良好的分散性、粒徑均一、極低的非特異結(jié)合和豐富的結(jié)合位點(diǎn)等特點(diǎn),可用于帶有HA標(biāo)簽的蛋白免疫沉淀(IP)。

 

產(chǎn)品性質(zhì)

 

配體

Anti-HA Antibody1A4)

粒徑

200 nm

結(jié)合能力

>0.6 mg蛋白/mL 磁珠

磁珠體積

10 mg/mL

儲(chǔ)存緩沖液

10 mM sodium phosphate, 150 mM sodium chloride, pH7.4, containing 0.02% (v/v) ProClin 30

 

運(yùn)輸和保存方法

 

冰袋運(yùn)輸。2-8℃儲(chǔ)存。避免凍存!有效期1年。

 

注意事項(xiàng)

 

  1. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

  2. 本產(chǎn)品僅作科研用途!

 

使用方法

 

以免疫沉淀(IP)為例,步驟如下:

1樣品準(zhǔn)備

樣品可以是細(xì)菌發(fā)酵液或者細(xì)胞裂解液, 樣品中不能含有顆粒不溶物,可以用0.22 μm濾膜過(guò)濾或10,000×g離心15 min。

2 磁珠預(yù)處理

2.1 用移液器輕柔吹打Anti-HA免疫磁珠,使其充分混懸,取 25~50 µL 磁珠懸液置于1.5 mL離心管中。

2.2 加入500 µL IP Lysis/Wash Buffer并輕輕移液器混合,用移液器輕柔吹打重懸Anti-HA免疫磁珠,接著在磁力架上靜置1 min后,吸棄上清。

2.3 重復(fù)步驟 2.2 兩次。

3樣品的結(jié)合

3.1 在預(yù)處理后的磁珠中加入蛋白樣品,置于翻轉(zhuǎn)混合儀上孵育(常溫2 h,4 ℃過(guò)夜);

3.2 將上述混合液置于磁力架上靜置1 min,然后把上清液轉(zhuǎn)移到新的離心管中備用(上清液可用于檢測(cè)HA標(biāo)簽蛋白是否存在殘留),原離心管中剩余的即為 蛋白-磁珠復(fù)合物;

注意:結(jié)合過(guò)程中,磁珠可能會(huì)出現(xiàn)聚團(tuán)或呈片狀,屬于正常現(xiàn)象,不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

4洗滌

4.1 向步驟3.2所得的蛋白-磁珠復(fù)合物中加入 500 µL IP Lysis/Wash Buffer ,用移液器輕柔吹打重懸,接著在磁力架上靜置 1 min 后, 吸棄上清;

4.2 重復(fù)步驟4.1兩次,直至洗滌后的上清液OD280小于0.05為止;

注意:如上清液的OD280仍大于0.05,則適當(dāng)增加洗滌次數(shù)。

5蛋白洗脫

根據(jù)下游用途選擇洗脫方法。

5.1 HA融合蛋白洗脫

1) 配制HA多肽洗脫液:TBS中溶解HA多肽,終濃度為0.2-1 mg/mL。

2) 分別加入100 μL HA多肽洗脫液,4 ℃孵育2 h-6 h(慢慢搖晃)

3) 分離磁珠上的磁珠并保存含有目標(biāo)抗原的上清液。

4) 重復(fù)洗脫步驟一次以獲得更高的回收率

5.2 酸性洗脫(0.1 M Gly-HCl,pH 3.0

1)加入100 μL 0.1 M Gly-HCl,pH 3.0,室溫孵育5-10 min(慢慢搖晃)。

2)分離磁珠上的磁珠并保存含有目標(biāo)抗原的上清液。

3)中和低pH,每100 μL洗脫液加入20 μL中和緩沖液(1M Tris pH8.5)。最后的溶液可以用作樣品用于變性 SDS-PAGE。

5.3 用SDS-PAGE上樣緩沖液洗脫

如需直接檢測(cè)目的蛋白,則在上述洗滌過(guò)的蛋白-磁珠復(fù)合物中加入100 μL 1×SDS-PAGE上樣緩沖液,煮沸 5 min,冷卻至室溫并在磁力架上靜置 1 min 后,取上清進(jìn)行 SDS-PAGE 檢測(cè)。

 




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