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供貨周期 | 現貨 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產業(yè) |
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產品簡介
人血清白蛋白 (Human Serum Albumin),簡稱HSA,由580個氨基酸殘基單鏈組成,約占血液中總蛋白的60%。它主要由肝臟產生,對維持膠體滲透壓極其重要,還保持了血管室和血管外組織之間的流體平衡。同時作為一種運輸蛋白,攜帶脂肪酸、以及各種藥物和激素。血清白蛋白升高常見于濃縮脫水、大量出汗。降低則見于多種疾病,比如肝炎、腎病、營養(yǎng)不良等。
翌圣Human Serum Albumin (HSA) ELISA(酶聯免疫吸附測定)試劑盒是一種體外酶聯免疫吸附測定試劑盒,用于定量測定血清、血漿中的人血清白蛋白(Human Serum Albumin)。特異性抗人血清白蛋白抗體預包被在高親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本,經過孵育,樣本中存在的人血清白蛋白與固相抗體結合。洗滌去除未結合的物質后,加入檢測抗體孵育結合,經洗滌,再加入酶結合物(Streptavidin-HRP)孵育結合。洗滌后,加入顯色底物 TMB,避光顯色。顏色反應的深淺與樣本中人血清白蛋白的濃度成正比。加入終止液終止反應,在450 nm 波長(參考波長570 - 630 nm)測定吸光度值。
產品信息
貨號 | 97048ES48 / 97048ES96 |
規(guī)格 | 48 T / 96 T |
檢測范圍 | 3.13-200 ng/mL |
檢測方法 | 雙抗夾心法 |
檢測物種 | 人 |
檢測時長 | 4小時 |
靈敏度 | 0.2 ng/mL |
稀釋線性 | 81 - 126% |
回收率 | 85 - 118% |
板內差 | 7.9% |
板間差 | 8.3% |
實驗數據
標曲數據
數據擬合繪制標準曲線,生成的標曲用于實驗數據分析。
標準曲線圖
濃度(ng/mL) | 顯色值 | 平均值 | 校準值 | |
200 | 2.189 | 2.201 | 2.195 | 2.107 |
100 | 1.306 | 1.393 | 1.350 | 1.262 |
50 | 0.776 | 0.843 | 0.810 | 0.722 |
25 | 0.429 | 0.430 | 0.430 | 0.342 |
12.5 | 0.273 | 0.257 | 0.265 | 0.177 |
6.25 | 0.183 | 0.192 | 0.187 | 0.099 |
3.13 | 0.143 | 0.152 | 0.147 | 0.059 |
0 | 0.083 | 0.092 | 0.088 | / |
靈敏度檢測
人血清白蛋白的低檢測限為0.2 ng/mL,通過使用重復檢測20次零孔OD值的均值與標準差計算得出。
精密度檢測
酶標板內精密度
3個已知濃度的樣本酶標板內重復測定20次,評估酶標板內的精密度。
酶標板間精密度
3個已知濃度的樣本酶標板間重復檢測36次,評估酶標板間的精密度。
項目 | 板內精密度 | 板間精密度 | ||||
樣本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
20 | 20 | 20 | 36 | 36 | 36 | |
平均值 | 90 | 21.3 | 2.22 | 90.8 | 22.03 | 2.3 |
標準差 | 4.6 | 2.3 | 0.2 | 6.37 | 1.8 | 0.22 |
變異系數(%) | 5.2 | 10.9 | 7.5 | 7.0 | 8.2 | 9.6 |
回收率檢測
通過不同水平的人血清白蛋白添加于樣本中來測定回收率,其回收率如下:
樣本類型 | 平均回收率(%) | 范圍(%) |
血清 | 104.5 | 84.5-117.7 |
血漿 | 99.2 | 88.0-110.0 |
細胞培養(yǎng)上清 | 100.5 | 91.8-111.0 |
稀釋線性檢測
血清稀釋比例 | 平均期望值(%) | 范圍(%) |
1:02 | 97.7 | 87.8-100.4 |
1:04 | 96.9 | 82.8-104.4 |
1:08 | 99.2 | 82.4-109.2 |
1:16 | 104.5 | 83.6-125.7 |
血漿稀釋比例 | 平均期望值(%) | 范圍(%) |
1:02 | 100.2 | 82.2-115.2 |
1:04 | 93.8 | 83.2-108.6 |
1:08 | 90.8 | 80.8-111.2 |
1:16 | 100.1 | 82.0-116.9 |
細胞培養(yǎng)上清稀釋比例 | 平均期望值(%) | 范圍(%) |
1:02 | 103.8 | 102.3-105.9 |
1:04 | 98.0 | 93.7-100.5 |
1:08 | 99.8 | 91.8-111.0 |
1:16 | 116.0 | 89.1-124. |
應用本試劑盒,檢測若干健康志愿者的樣本,志愿者的用藥史不詳。
樣本類型 | 樣本數目 | 平均值(mg/mL) | 樣本值(mg/mL) |
血清 | 6 | 22.6 | 9.7-58.2 |
血漿 | 6 | 20.7 | 11.1-36.6 |
細胞培養(yǎng)上清 | 3 | n.d. | n.d. |
n.d. 指樣本濃度值低于檢測范圍內得3.13 ng/mL
測定特異性
本試劑盒識別天然和重組人血清白蛋白。下述因子進行了特異性的評估,沒有觀察到明顯的交叉反應和干擾影響。
Recombinant human: | Natural proteins: |
a-Fetoprotein | Human Pre-Albumin |
Parvalbumin | Bovine Serum Albumin |
Mouse Serum Albumin |
檢測簡圖
疑問解答
問題 | 造成原因 | 解決方法 |
標曲不好 | 移液量不準確 | 檢查移液器,按時校準,仔細操作,充分混勻時蓋緊管口并盡量避免泡沫。 |
稀釋方法不恰當 | ||
顯色值偏低 | 孵育時間太短 | 給予足夠的孵育時間,樣本和溶解的標準品隔夜后更換。 |
移液量不足或稀釋不當 | 校準移液器和規(guī)范操作 | |
CV偏高 | 酶標板清洗不當 | 使用正確的洗滌工序;如果使用洗板機,檢查所有的端口是否堵塞。 |
受污染的洗液 | 準備新鮮洗液 | |
靈敏度較低 | 試劑盒儲存不當 | 按照產品組分表進行保存。 |