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THP-1/NF-kB/Lu cell line細胞
THP-1/NF-kB/Lu cell line細胞

地:Genomeditech

貨物所在地:上海上海市

更新時間:2024/9/1 21:01:14

訪問次數(shù):246

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后:
4006-111-883
真:
86-21-34615995
址:
上海市浦東新區(qū)天雄路166弄1號3樓
網(wǎng)址:
www.yeasen.com

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供應簡介
THP-1/NF-KB/Lu cell line是用人急性單核細胞性白血病細胞THP-1(懸浮細胞)通過慢病毒轉(zhuǎn)染方法,將REPOTMNF-kB報告基因轉(zhuǎn)入THP-1細胞構(gòu)建而成的穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞株。


詳細介紹

 

 REPOTMNF-kB報告基因的結(jié)構(gòu)是以4個重復的NF-kB轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點和TA box作為啟動子,啟動Luciferase的表達,并通過嘌呤霉素進行篩選。THP-1/NF-KB/Lu cell line主要用于檢測細胞中NF-kB信號轉(zhuǎn)導通路的活性和藥物篩選等。THP-1/NF-KB/Lu cell line的應用大大節(jié)省了研究人員的寶貴時間和精力,為研究人員提供了更簡便,快速和有效的研究方法。
 
產(chǎn)品清單:

產(chǎn)品名稱
產(chǎn)品規(guī)格
產(chǎn)品包裝
保存條件
產(chǎn)品編號
THP-1/NF-KB/Lu cell line
6×106
1
液氮
GM-023001
說明書
-
-
-
-

保存條件:
液氮保存,干冰運輸。
穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株的穩(wěn)定性:
基因組的不穩(wěn)定性是所有穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株共同存在,且不可避免的一個生物現(xiàn)象。因此,我們建議客戶在拿到細胞后的開始階段就進行大量細胞凍存是很關(guān)鍵的。
培養(yǎng)條件:
1.        培養(yǎng)基:RPMI1640(2 mM L-glutamine,1.5g/L sodium bicarbonate,4.5 g/L glucose,10 mM HEPES and 1.0 mM sodium pyruvate )+10%胎牛血清+100ug/ml雙抗;選擇培養(yǎng):+0.51μg/ml嘌呤霉素
2.        培養(yǎng)條件:37,5%CO2
3.        凍存條件:常規(guī)培養(yǎng)基+20%胎牛血清+10%DMSO
細胞培養(yǎng):
1.        細胞復蘇
(1). 細胞實驗室進行常規(guī)消毒,紫外照射40min以上。
(2). 
恒溫水浴箱37預熱20min,備用。
(3). 
從液氮保存罐中取出凍存管,立即放入37水浴箱中,快速搖晃,直至凍存液*融化。
注:水浴箱中的水不能接觸瓶蓋。
(4). 
將細胞懸液移入15ml離心管,緩慢加入4ml培養(yǎng)液,離心(1000r/min5min)。
(5). 
用培養(yǎng)基懸液混懸沉淀細胞,調(diào)整細胞濃度,放培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.        細胞培養(yǎng)
(1). 細胞每隔34天傳代一次,每次傳代密度為7×105/ml
(2).
為了保證細胞的良好生長狀態(tài),細胞培養(yǎng)時密度不能大于2×106/ml。
3.        細胞凍存
凍存時的細胞密度應達到57×106/ml,這才能保證更好的復蘇效率。
THP-1/NF-KB/Lu cell Luciferase的檢測:
1.   將適量濃度的THP-1/NF-KB/Lu cell細胞接種于96孔板/24孔板/6孔板等,37,5%CO2,過夜培養(yǎng);
2.   研究者根據(jù)實驗要求,向THP-1/NF-KB/Lu cell 中加入所需生物制劑(siRNA、shRNA、化合物、慢病毒表達載體、蛋白等);
3.   繼續(xù)培養(yǎng)18~36h后,按照熒光素酶檢測試劑盒或雙熒光素酶檢測試劑盒得要求,進行Luciferase表達量的檢測。
注意事項:
細胞為凍存狀態(tài)運輸,收到細胞后建議馬上復蘇、培養(yǎng)。如果暫時不使用請繼續(xù)保持液氮儲存。
 
產(chǎn)品價格:

貨號
名稱
產(chǎn)地
規(guī)格
報價/
GM-023001
THP-1/NF-kB/Lu cell line細胞
Genomeditech
1
20000

 

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