Chinese Name/中文名	小鼠白三烯B4（LTB4）ELISA Kit
English Name/英文名	Mouse Leukotriene B4,LT-B4 ELISA Kit
Catalog Number/目錄號(hào)
Organism/種屬	小鼠
Packing/規(guī)格	96T/Kit（812strips）/ 48T/Kit（86strips）
Detection Range/檢測范圍	0.31-20ng/mL
Sensitivity/靈敏度	0.19ng/mL
Method/檢測方法	Sandwich-ELISA/雙抗體夾心ELISA
Sample Type/樣品類型	Serum, Plasma, Other biological fluids/血清、血漿等其它生物樣品
Other Names/其他名稱

小鼠白三烯B4（LTB4）ELISA Kit

問題1：如果我們檢測的樣本是組織樣本，請問應(yīng)該選用什么來組織勻漿,濃度是多少?
答：一般我們試劑盒的組織勻漿，都是按照10%進(jìn)行勻漿,即1g組織加9ml的勻漿液，勻漿液可以選取sheng理鹽水，也可以選取PBS,但*是PBS,PH=7.2-7.4,濃度為0.01mol.
問題2：請問我訂購了你們的試劑盒，但是樣本是分批次收集的，我可以分批次實(shí)驗(yàn)嗎。
答：可以的，我們的試劑盒橫條是可拆卸的，試劑盒使用之后放到2-8度冰箱保存，下次可以繼續(xù)使用，但是建議是拆封之后一個(gè)月內(nèi)用完。
問題3：請問各種標(biāo)本的處理方式，你可以發(fā)給我一下嗎？
答：當(dāng)然可以。標(biāo)本要求如下：
在收集樣本前都必須有一個(gè)完整的計(jì)劃，必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對(duì)收集后當(dāng)天就進(jìn)行檢測的樣本，及時(shí)儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆?。?duì)于隔天再檢測的樣本，及時(shí)分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆?，有條件的，-70℃凍存?zhèn)溆谩?biāo)本應(yīng)避免反復(fù)凍融。
液體類標(biāo)本: 包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。
2.血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。
3.尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
4.細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
5.培養(yǎng)細(xì)胞：檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
6.組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑，用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
7.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
8.不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

組成及試劑配制

1.酶聯(lián)板：兩塊（96孔）

2.標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）：2瓶，每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為1,600 pg/ml，將其稀釋為400 pg/ml后，再做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別稀釋成400 pg/ml，200 pg/ml，100 pg/ml，50 pg/ml，25 pg/ml，12.5 pg/ml，6.25 pg/ml，樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 pg/ml，臨用前15分鐘內(nèi)配制。如配制200 pg/ml標(biāo)準(zhǔn)品：取0.5ml （不要少于0.5ml ） 400 pg/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。

3.樣品稀釋液：1×20ml。

4.檢測稀釋液A：1×10ml。

5.檢測稀釋液B：1×10ml。

6. 檢測溶液A：1×120μl（1:100）臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋，稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制（100μl/孔），實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl檢測溶液A加990μl檢測稀釋液A的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。

7.檢測溶液B：1×120μl/瓶（1:100）臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。

8.底物溶液：1×10ml/瓶。

9.濃洗滌液：1×30ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。

10.終止液：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

11.覆膜：5張

12.使用說明書：1份

自備物品

1.酶標(biāo)儀（建議參考儀器使用說明提前預(yù)熱）

2.微量加液器及吸頭，EP管

3.蒸餾水或去離子水，全新濾紙

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