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轉(zhuǎn)染試劑的使用及效果

閱讀:1512      發(fā)布時(shí)間:2022-11-21
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   轉(zhuǎn)染試劑是一種獨(dú)特的陽離子脂質(zhì)配方,適用細(xì)胞系種類多,轉(zhuǎn)染效率高,而且具有很高的蛋白質(zhì)表達(dá)水平或基因沉默或活性 (RNAi)。該產(chǎn)品是出色的轉(zhuǎn)染試劑,可簡單、高效、優(yōu)質(zhì)地將核酸轉(zhuǎn)入多種真核細(xì)胞內(nèi),而且適用于高通量操作。
  轉(zhuǎn)染試劑由納米高分子聚合物組成,分子內(nèi)含有許多氨基,在生理PH下會(huì)發(fā)生質(zhì)子化,這些質(zhì)子化的氨基可以中和DNA質(zhì)粒表面的負(fù)電荷,使DNA分子由伸展結(jié)構(gòu)壓縮為體積相對(duì)較小的DNA粒子,并包裹在其中,使DNA免受核酸酶的降解。轉(zhuǎn)染復(fù)合物主要是通過細(xì)胞內(nèi)吞作用將DNA轉(zhuǎn)移進(jìn)入細(xì)胞,形成內(nèi)含體,DNA從內(nèi)含體釋放,進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)中,再進(jìn)一步進(jìn)入核內(nèi)轉(zhuǎn)錄、表達(dá)。通過納米技術(shù)生產(chǎn)出的轉(zhuǎn)染試劑在納米尺度表現(xiàn)出結(jié)合保護(hù)DNA能力強(qiáng)、毒性低的性能。
  轉(zhuǎn)染試劑的應(yīng)用:
  將DNA導(dǎo)入哺乳動(dòng)物細(xì)胞和昆蟲細(xì)胞。
  同病毒協(xié)同轉(zhuǎn)染難轉(zhuǎn)哺乳動(dòng)物細(xì)胞,可顯著增強(qiáng)病毒的轉(zhuǎn)染效率。
  轉(zhuǎn)染試劑的使用及效果:
  將2μg無內(nèi)毒素質(zhì)粒DNA和4μL本產(chǎn)品分別稀釋到50μL溶液A中,將上述兩溶液混勻,加入到在1mL培養(yǎng)基中生長了18-24小時(shí)、覆蓋率達(dá)到50-80%的培養(yǎng)細(xì)胞中,輕搖以混勻,然后在37℃/5%CO2孵箱中培養(yǎng),24-72小時(shí)后根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要進(jìn)行瞬時(shí)表達(dá)分析或穩(wěn)定細(xì)胞系加壓篩選。
  轉(zhuǎn)染試劑主要用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞和昆蟲細(xì)胞的瞬時(shí)轉(zhuǎn)染以及穩(wěn)定細(xì)胞系構(gòu)建,可以將轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)操作縮短到一分鐘即可完成。本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
  1、本產(chǎn)品和質(zhì)?;旌虾鬅o需室溫靜置孵育,直接轉(zhuǎn)染。
  2、毒性低,轉(zhuǎn)染后細(xì)胞存活率高。
  3、適合于多種常用的細(xì)胞系。
  4、可直接加入含血清的細(xì)胞培養(yǎng)基中進(jìn)行轉(zhuǎn)染,而且無需在轉(zhuǎn)染后補(bǔ)加血清和更換超快轉(zhuǎn)染試劑盒培養(yǎng)基。
  5、如果實(shí)驗(yàn)?zāi)康脑谟诤Y選抗藥性穩(wěn)定細(xì)胞系,可以在細(xì)胞傳代后可直接進(jìn)行轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn),不需轉(zhuǎn)染前細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間。
  6、無需在轉(zhuǎn)然后4-6小時(shí)補(bǔ)加血清或更換培養(yǎng)基。
 
 

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