在生物實驗室中,支原體污染是一個常見且嚴重的問題,它可能對細胞培養(yǎng)、實驗結果甚至臨床應用造成嚴重影響。為了快速、準確地檢測支原體污染,LONZA支原體檢測試劑盒憑借其高效、簡便的操作流程,成為了實驗室中的得力助手。本文將詳細介紹LONZA支原體檢測試劑盒的操作指南,旨在簡化流程,確保結果的準確性。
一、準備工作
首先,確保實驗環(huán)境干凈整潔,儀器設備正常工作。準備好LONZA支原體檢測試劑盒、無菌吸管、離心管、生理鹽水等實驗耗材。同時,仔細閱讀試劑盒的操作手冊,了解所有試劑的保存條件和使用方法。
二、樣本處理
收集待檢測的細胞培養(yǎng)液或其他相關樣本。使用無菌吸管將樣本移至離心管中,按照推薦的轉速和時間進行離心處理,以去除雜質和細胞碎片。然后,根據試劑盒的說明,用適量的生理鹽水重新懸浮細胞沉淀,得到待檢測的樣本懸液。
三、操作步驟
取出試劑盒:打開試劑盒蓋子,取出所需的試劑,注意避免污染。
加入試劑:按照試劑盒的操作步驟,依次向樣本懸液中加入MycoAlert? PLUS試劑和底物。注意操作仔細,避免交叉污染。
反應與檢測:將反應體系置于室溫(18°C~22°C)下,等待一定時間后,使用光度計讀取反應前后的光信號強度。根據試劑盒提供的標準曲線或計算公式,計算出樣本中支原體的含量。
四、結果解讀
根據光度計的讀數結果,通過比較Read B與Read A的比率,可以判斷樣本中是否存在支原體污染。比率小于1表示支原體陰性,無支原體污染;比率在1到1.2之間表示結果不確定,需要重新檢測;比率大于1.2表示支原體陽性,存在支原體污染。
五、注意事項
在整個操作過程中,應嚴格遵守無菌操作規(guī)范,避免污染樣本和試劑。
試劑的保存和使用應按照說明書要求進行,避免影響檢測結果。
光度計的校準和維護應定期進行,確保測量結果的準確性。
綜上所述,LONZA支原體檢測試劑盒以其簡化的操作流程和準確的檢測結果,為生物實驗室中的支原體檢測提供了有力支持。
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