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Paxgene血液RNA管使用方法
閱讀：1412發(fā)布時(shí)間：2024-2-4
PAXgene血液RNA管旨在立即穩(wěn)定細(xì)胞內(nèi)RNA，從而產(chǎn)生準(zhǔn)確且可重復(fù)的基因表達(dá)數(shù)據(jù)。PAXgene血液RNA管含有一種專有試劑，可在采集后立即穩(wěn)定細(xì)胞內(nèi)RNA。細(xì)胞內(nèi)RNA在室溫下穩(wěn)定長(zhǎng)達(dá)三天或在2-8°C下穩(wěn)定長(zhǎng)達(dá)五天。PAXgene試管可以在-20°C至-70°C的溫度下冷凍，以便長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
BD 762165 Paxgene血液RNA管使用方法：
1.將0.2-1.5mL新鮮或解凍后的抗凝全血加入到1.5mL塑料離心管中。
2.12，000rpm室溫離心3分鐘，棄上清（血漿）。如果此時(shí)血液細(xì)胞沉淀體積大于0.2mL，則需要減少血液的使用量，具體減少量需根據(jù)具體情況決定，因?yàn)楦鱾€(gè)個(gè)體（尤其是患者）血液中白細(xì)胞數(shù)目差別很大。
3.將1mL溶液A加入到血液細(xì)胞沉淀中，用移液槍吹打沉淀使細(xì)胞裂解。
4.將0.3mL的溶液B加入到離心管中，劇烈震蕩30秒。
5.和0.2mL氯仿加入到離心管中，劇烈震蕩30秒。
6.12，000rpm室溫離心3-5分鐘，將上清液（為無(wú)色或淺紅色，約0.5-0.9mL）轉(zhuǎn)移到另一干凈離心管中。為防止污染，建議留100uL左右的上清液。下層有機(jī)相一般呈深紅色，中間層為白色，含有DNA，蛋白質(zhì)和其他細(xì)胞破碎物，避免觸及或吸取。
7.在上清液中加入0.5mL的溶液C和0.2mL的自備氯仿，用手上下顛倒或振蕩器振蕩30秒混勻，此時(shí)溶液呈均勻的乳濁狀。振蕩器振蕩時(shí)必須使管底溶液震蕩起來(lái)。
8.室溫12，000rpm離心3分鐘，兩相間將有白色膜狀物（蛋白質(zhì)）形成。
9.將上清液（約1mL）轉(zhuǎn)移到另一干凈的1.5mL塑料離心管中，避免觸及或吸取有機(jī)相及其上面的白色膜狀物。
10.在上清液中加入0.5倍體積的溶液D，用手上下顛倒或振蕩器振蕩30秒混勻。振蕩器振蕩時(shí)必須使管底溶液震蕩起來(lái)。
BD全血RNA管762165具有下列特點(diǎn)：
◆ 體外診斷使用,具有CE-IVD標(biāo)志,符合歐盟98/79/EC 指令
◆ 整合的系統(tǒng),用于采集、穩(wěn)定和純化胞內(nèi)RNA
◆ 提供在分析工作進(jìn)行之前的樣本標(biāo)準(zhǔn)化處理
◆ 在 18~25℃下,RNA穩(wěn)定可長(zhǎng)達(dá)3天
◆ 在-20℃ 或 -70℃條件下至少穩(wěn)定50個(gè)月
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