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移液器常規(guī)的使用流程,只要是做過實驗的都知道,一個完整的移液循環(huán)包括下面六個步驟:
但為什么移液仍然是一個難題呢?接下來就要從每個步驟詳細說說了,如何每一步做到標準操作,實現(xiàn) 0 誤差!
1、吸頭安裝 - 旋轉(zhuǎn)安裝法
■ 使用合適移液器量程的吸頭,為保證良好的密封性,將移液器垂直插入吸頭,左右旋轉(zhuǎn)半圈,上緊即可,建議移液量在吸頭的 35%-100%量程范圍內(nèi)。(多道移液器建議使用進口吸頭)
2、容量設定:粗調(diào)/細調(diào)
■ 從大量程調(diào)節(jié)至小量程為正常調(diào)節(jié)方法,逆時針旋轉(zhuǎn)刻度即可。
■ 從小量程調(diào)節(jié)至大量程時,應先調(diào)至超過設定體積刻度,再回調(diào)至設定體積。
(不要將按鈕旋出量程范圍,否則會卡住機械裝置,損壞移液器。)
3、潤洗吸頭
■ 在安裝了新的吸頭或增大了容量值以后,液體吸取、排放兩到三次,吸頭內(nèi)壁表面吸附達到飽和,確保移液工作的精度和準度;
4、吸液
■ 不同量程移液器吸液時吸頭浸液深度
•0.1-2.5ul/0.5-10ul ≤ 1mm
•2-20ul/10-100ul/20-200ul ≤ 2mm
•100-1000ul ≤ 3mm
•1000-5000ul/2-10ml ≤ 4mm
■ 正向移液(密度低的溶液)
1. 按下按鈕到停點;
2. 輕緩松開按鈕到起始點完成吸液;
3. 輕按按鈕至停點,排除液體;稍停片刻,繼續(xù)按按鈕,排空液體;
4. 松開按鈕,回到原點。如果需要,更換吸頭后繼續(xù)移液。
■ 反向移液(適用于粘稠液體或易揮發(fā)性液體)
1. 按下按鈕至第二停點吸液,輕緩松開按鈕到起始點完成吸液。吸取多于設定容量的液體;
2. 輕按按鈕至停點,排除設定容量的液體;
3. 殘留在吸頭內(nèi)的多余液體隨吸頭丟棄。
5、排液
■ 吸頭緊貼容器壁,先將排放按鈕按至停點,稍微停頓,再按至第二停點,這樣可保證吸頭內(nèi)無殘留液體。如果仍然有殘留,需要更換吸頭。
6、卸去吸頭
■ 除去槍頭后,將移液器調(diào)至大量程。
在移液器操作的后,還有幾個 TIPS 務必要記得:
• 不要用大量程的移液器移取小體積的液體;
• 使用與移液器匹配的槍頭;
• 吸液太快產(chǎn)生氣泡,液體浸入移液器腐蝕內(nèi)部;
• 所設量程不可超出移液器有效量程范圍,損壞移液器;
• 吸有液體的移液器不可平放,吸頭內(nèi)的液體容易污染移液器內(nèi)部;
• 移液器在每次實驗后應將刻度調(diào)至大,讓彈簧回復原型以延長移液器的使用壽命;
• 使用時檢查是否有漏液現(xiàn)象。吸取液體后懸空垂直放置幾秒鐘,看看液面是否下降。如果漏液,則檢查吸頭是否匹配和彈簧活塞是否正常;
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