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雞蛋卵黃高磷蛋白磷酸肽試劑盒：食品營養(yǎng)與生物活性研究的得力助手
雞蛋卵黃高磷蛋白磷酸肽試劑盒是用于檢測(cè)雞蛋卵黃中 PPPs 含量的專業(yè)工具，在食品科學(xué)、營養(yǎng)學(xué)及生物活性物質(zhì)研究領(lǐng)域具有重要意義。PPPs 是卵黃高磷蛋白經(jīng)酶解后產(chǎn)生的功能性多肽，富含絲an酸磷酸化殘基，具有促進(jìn)鈣吸收、調(diào)節(jié)礦物質(zhì)代謝、抗氧化等多種生物學(xué)活性，其含量高低直接影響雞蛋的營養(yǎng)價(jià)值及相關(guān)產(chǎn)品的功能性。
該試劑盒多采用高效液相色譜（HPLC）法或酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）法，其中 ELISA 法基于雙抗體夾心原理設(shè)計(jì)較為常見。以 ELISA 試劑盒為例，其核心組件包含預(yù)包被抗 PPPs 抗體的微孔板、PPPs 標(biāo)準(zhǔn)品、酶標(biāo)記的檢測(cè)抗體、顯色底物及洗滌液等。檢測(cè)時(shí)，將雞蛋卵黃提取物、蛋液樣本或相關(guān)產(chǎn)品溶液加入預(yù)包被抗體的微孔板，若樣本中存在 PPPs，會(huì)與固相抗體特異性結(jié)合；隨后加入酶標(biāo)記的檢測(cè)抗體，形成 “固相抗體 - PPPs - 酶標(biāo)抗體" 夾心復(fù)合物。經(jīng)過嚴(yán)格洗滌去除未結(jié)合物質(zhì)后，添加顯色底物，在酶的催化下發(fā)生顯色反應(yīng)，顏色深淺與樣本中 PPPs 含量呈正相關(guān)，最后通過酶標(biāo)儀測(cè)定吸光度值，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出 PPPs 濃度。若采用 HPLC 法，需將樣本經(jīng)預(yù)處理后注入色譜柱，利用不同物質(zhì)在固定相和流動(dòng)相之間分配系數(shù)的差異實(shí)現(xiàn)分離，再通過紫外或熒光檢測(cè)器進(jìn)行定量分析。
在樣本處理環(huán)節(jié)，針對(duì)雞蛋卵黃樣本，需先將卵黃分離，采用機(jī)械攪拌或超聲處理破碎卵黃顆粒，再通過合適的溶劑（如磷酸鹽緩沖液）提取其中的 PPPs，經(jīng)離心去除雜質(zhì)后獲取上清液用于檢測(cè)。對(duì)于液態(tài)蛋制品，可直接離心去除懸浮物后取適量樣本檢測(cè)；固態(tài)蛋制品則需研磨成粉末，經(jīng)溶解、離心等步驟處理后取上清。所有樣本處理后若不能及時(shí)檢測(cè)，需低溫保存，避免 PPPs 因氧化、降解等因素影響檢測(cè)結(jié)果。