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考馬斯亮藍(lán)法蛋白試劑盒
考馬斯亮藍(lán)法蛋白試劑盒，是生物科研、醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)以及食品分析等領(lǐng)域用于定量檢測(cè)蛋白質(zhì)含量的重要工具。其核心技術(shù)考馬斯亮藍(lán)染色法，憑借操作簡(jiǎn)便、靈敏度較高等特性，備受科研與檢測(cè)人員青睞。
該試劑盒的檢測(cè)原理基于考馬斯亮藍(lán) G - 250 與蛋白質(zhì)之間的特異性結(jié)合反應(yīng)?？捡R斯亮藍(lán) G - 250 在酸性環(huán)境下呈棕紅色，當(dāng)它與蛋白質(zhì)分子中的堿性氨基酸（如精an酸、賴(lài)氨酸）殘基以及芳香族氨基酸殘基結(jié)合后，分子結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，最大吸收峰從 465nm 轉(zhuǎn)移至 595nm，溶液顏色由棕紅色變?yōu)樗{(lán)色，且在一定范圍內(nèi)，藍(lán)色的深淺與蛋白質(zhì)含量成正比。試劑盒內(nèi)包含了考馬斯亮藍(lán) G - 250 染色液以及經(jīng)過(guò)精確濃度標(biāo)定的蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品等試劑。
在操作流程上，該試劑盒設(shè)計(jì)得十分便捷。實(shí)驗(yàn)人員首先要依據(jù)樣本類(lèi)型，采用合適的方法進(jìn)行樣本采集與預(yù)處理。對(duì)于細(xì)胞樣本，常使用細(xì)胞裂解液將細(xì)胞破碎，釋放出細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)；對(duì)于組織樣本，則需進(jìn)行勻漿、離心等操作以獲取蛋白質(zhì)溶液；若是食品樣本，需根據(jù)食品特性，經(jīng)研磨、提取、過(guò)濾等步驟制備蛋白質(zhì)提取液。樣本處理完畢后，取一定量的樣本溶液加入到干凈的比色管或酶標(biāo)板孔中，同時(shí)設(shè)置一系列含有不同濃度蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品的對(duì)照管或孔。接著，向各管或孔中加入等量的考馬斯亮藍(lán) G - 250 染色液，迅速振蕩混勻，使蛋白質(zhì)與染色液充分結(jié)合。染色反應(yīng)通常在室溫下進(jìn)行，反應(yīng)時(shí)間一般為 5 - 15 分鐘，期間溶液顏色逐漸由棕紅色轉(zhuǎn)變?yōu)樗{(lán)色。反應(yīng)結(jié)束后，使用分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀在 595nm 波長(zhǎng)處測(cè)定各管或孔溶液的吸光度值。最后，以蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為橫坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)的吸光度值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，并根據(jù)樣本溶液的吸光度值從標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)上推算出樣本中蛋白質(zhì)的含量。
該試劑盒具備多項(xiàng)顯著優(yōu)勢(shì)。其靈敏度較高，能夠檢測(cè)出低至微克級(jí)別的蛋白質(zhì)含量，滿(mǎn)足大多數(shù)常規(guī)蛋白質(zhì)定量分析需求。操作簡(jiǎn)便快捷，整個(gè)檢測(cè)過(guò)程無(wú)需復(fù)雜的儀器設(shè)備和繁瑣的操作步驟，一般實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員經(jīng)過(guò)簡(jiǎn)單培訓(xùn)即可熟練掌握。而且該試劑盒的穩(wěn)定性良好，在規(guī)定的儲(chǔ)存條件下，試劑性能能夠長(zhǎng)時(shí)間保持穩(wěn)定，不同批次間的檢測(cè)結(jié)果也具有較高的一致性，為實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性提供了有力保障。