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北京長恒榮創(chuàng)科技有限公司
中級會(huì)員 | 第6年

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奧林巴斯CKX53顯微鏡觀察精子數(shù)量

時(shí)間:2025/4/21閱讀:28
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使用奧林巴斯 CKX53 顯微鏡觀察精子數(shù)量,一般可按以下步驟進(jìn)行:


奧林巴斯 CKX53 顯微鏡準(zhǔn)備工作

樣本采集:通過手淫等方式采集精液樣本,將其收集在無菌容器中。一般要求在采集后 1 小時(shí)內(nèi)進(jìn)行檢測,以保證精子的活性和形態(tài)不受影響。

樣本處理:將精液樣本在 37℃恒溫箱中孵育,使其充分液化。液化后,若精液量過多或精子濃度過高,可能需要用生理鹽水或?qū)iT的精子稀釋液進(jìn)行適當(dāng)稀釋,以確保在顯微鏡下能夠清晰地觀察和計(jì)數(shù)精子。

準(zhǔn)備玻片:準(zhǔn)備干凈的載玻片和蓋玻片,用移液器吸取適量處理后的精液樣本滴在載玻片上,然后輕輕蓋上蓋玻片,注意避免產(chǎn)生氣泡。


奧林巴斯 CKX53 顯微鏡設(shè)置

光源調(diào)節(jié):打開奧林巴斯 CKX53 顯微鏡的光源,通過調(diào)節(jié)亮度旋鈕和孔徑光闌,使光線強(qiáng)度適中且均勻。過強(qiáng)的光線可能會(huì)導(dǎo)致精子圖像過亮,影響觀察和計(jì)數(shù);過弱的光線則會(huì)使視野昏暗,難以看清精子形態(tài)。

物鏡選擇:通常先使用低倍物鏡(如 10 倍物鏡)進(jìn)行初步觀察,找到精子較為集中的區(qū)域,然后再切換到高倍物鏡(如 40 倍或更高倍數(shù)的物鏡)進(jìn)行詳細(xì)觀察和計(jì)數(shù)。高倍物鏡可以提供更清晰的精子形態(tài)細(xì)節(jié),但視野范圍會(huì)變小,需要仔細(xì)尋找和移動(dòng)玻片來觀察整個(gè)樣本區(qū)域。

調(diào)焦:使用粗調(diào)焦旋鈕將載物臺上升,使物鏡接近玻片,但要注意不要碰到玻片,以免損壞物鏡和樣本。然后通過目鏡觀察,慢慢調(diào)節(jié)粗調(diào)焦旋鈕使載物臺下降,同時(shí)注視視野,直到精子圖像大致清晰,再使用微調(diào)焦旋鈕進(jìn)行精細(xì)調(diào)焦,使精子圖像達(dá)到最清晰的狀態(tài)。


奧林巴斯 CKX53 顯微鏡精子計(jì)數(shù)

選擇計(jì)數(shù)區(qū)域:在高倍鏡下,選擇幾個(gè)具有代表性的視野進(jìn)行精子計(jì)數(shù)??梢园凑找欢ǖ捻樞?,如從左到右、從上到下依次觀察多個(gè)視野,以確保計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性和全面性。一般建議至少計(jì)數(shù) 5 個(gè)不同視野中的精子數(shù)量。

計(jì)數(shù)方法:對于每個(gè)選定的視野,使用計(jì)數(shù)器或在紙上記錄精子的數(shù)量??梢圆捎?“+" 或 “正" 字等方式進(jìn)行計(jì)數(shù),以避免重復(fù)或遺漏。注意區(qū)分精子的頭部、尾部和其他雜質(zhì),確保只對完整的、具有活性的精子進(jìn)行計(jì)數(shù)。對于難以判斷的物體,可以通過調(diào)節(jié)焦距或觀察其運(yùn)動(dòng)狀態(tài)來確定是否為精子。

計(jì)算精子數(shù)量:計(jì)數(shù)完所有選定視野中的精子數(shù)量后,根據(jù)樣本的稀釋倍數(shù)和視野面積等參數(shù),計(jì)算出每毫升精液中的精子數(shù)量。具體計(jì)算公式為:精子濃度(個(gè) /mL)=(計(jì)數(shù)的精子總數(shù) ÷ 計(jì)數(shù)的視野數(shù))× 稀釋倍數(shù) × 視野面積換算系數(shù)。其中,視野面積換算系數(shù)需要根據(jù)所使用的物鏡倍數(shù)和顯微鏡的參數(shù)進(jìn)行計(jì)算。


奧林巴斯 CKX53 顯微鏡注意事項(xiàng)

整個(gè)操作過程要保持樣本和玻片的清潔,避免污染。

觀察和計(jì)數(shù)時(shí)要保持專注,盡量減少外界干擾,以確保計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性。

奧林巴斯 CKX53 顯微鏡屬于精密儀器,使用過程中要嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行,避免粗暴操作導(dǎo)致儀器損壞。

為了獲得更準(zhǔn)確的結(jié)果,可以進(jìn)行多次重復(fù)計(jì)數(shù),并取平均值。同時(shí),還可以結(jié)合其他指標(biāo),如精子活力、精子形態(tài)等,對精液質(zhì)量進(jìn)行全面評估。


需要注意的是,精子數(shù)量的正常參考值會(huì)因不同的檢測方法和實(shí)驗(yàn)室而有所差異。一般來說,正常成年男性的精子濃度應(yīng)不低于 15×10?/mL。如果對精子數(shù)量或精液質(zhì)量有任何疑問,建議咨詢專業(yè)的醫(yī)生或生殖專家進(jìn)行進(jìn)一步的診斷和解讀。


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