產(chǎn)品名稱(chēng):海藻糖含量檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品英文名: Micro Trehalose Content Assay Kit

產(chǎn)品貨號(hào)：BC0335        產(chǎn)地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷8三樓

產(chǎn)品規(guī)格：100管/96樣        產(chǎn)品商標(biāo)：solarbio
保存與運(yùn)輸：4℃保存或-20℃保存；            參考價(jià)格：840
庫(kù)存狀態(tài)：現(xiàn)貨                          
關(guān)鍵字:    海藻糖檢測(cè)試劑盒| | 海藻糖|試劑盒

簡(jiǎn)要介紹：
海藻糖存在于大量有機(jī)體中，包括細(xì)菌、藻類(lèi)、酵母、植物、昆蟲(chóng)和其他無(wú)脊椎動(dòng)物。由于海藻糖具有*的不同于其他碳水化合物的生物學(xué)特性，能在干旱、高溫、脫水、冷凍、高滲透壓及毒性物質(zhì)等惡劣環(huán)境下保護(hù)生物體細(xì)胞蛋白質(zhì)、脂肪、糖類(lèi)、核酸等組分不受損害。

產(chǎn)品詳細(xì)描述
產(chǎn)品內(nèi)容：
提取液：液體100mL×1瓶，4℃保存；
試劑一：粉劑×1瓶，4℃保存；
標(biāo)準(zhǔn)品：粉劑×1支，含10mg海藻糖。
產(chǎn)品說(shuō)明：
海藻糖存在于大量有機(jī)體中，包括細(xì)菌、藻類(lèi)、酵母、植物、昆蟲(chóng)和其他無(wú)脊椎動(dòng)物。由于海藻糖具有*的不同于其他碳水化合物的生物學(xué)特性，能在干旱、高溫、脫水、冷凍、高滲透壓及毒性物質(zhì)等惡劣環(huán)境下保護(hù)生物體細(xì)胞蛋白質(zhì)、脂肪、糖類(lèi)、核酸等組分不受損害。
測(cè)定方法采用蒽酮比色法。具有靈敏度高﹑簡(jiǎn)便快捷﹑適用于微量樣品的測(cè)定等優(yōu)點(diǎn)。但是蒽酮比色法也存在一定缺陷，如果樣本中含有可溶性糖，則會(huì)影響測(cè)定。本試劑盒建議用于除海藻糖外不含其他可溶性糖樣本的測(cè)定。
需自備的儀器和用品：
可見(jiàn)分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿﹑研缽、濃硫酸和蒸餾水。

操作步驟：
一、海藻糖提取：   

1. 細(xì)菌或細(xì)胞處理：收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照每500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（功率20％，超聲3秒，間隔10秒，重復(fù)30次），室溫靜置45min，振蕩3~5次，冷卻后，8000g，常溫離心，取上清。
2. 組織的處理：稱(chēng)取約0.1g樣本，常溫研碎，加入1mL提取液，室溫靜置45min，振蕩3~5次，冷卻后，8000g，常溫離心，取上清。
3. 血清（漿）的處理：吸取約100μL血清（漿），加入0.9mL提取液，室溫靜置45min，振蕩3~5次，冷卻后，8000g，常溫離心，取上清。
4. 標(biāo)準(zhǔn)品的處理：標(biāo)準(zhǔn)品用1mL雙蒸水溶解，溶液濃度為10mg/mL，稀釋到0.1、0.08、0.06、0.04、0.02、0mg/mL。

二、測(cè)定操作表：

1. 分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min，波長(zhǎng)調(diào)節(jié)620nm，蒸餾水調(diào)零。調(diào)節(jié)水浴鍋95℃。
2. 工作液的配制：臨用前在每瓶試劑一中加入7mL蒸餾水后，緩慢加入28mL濃硫酸，不斷攪拌，充分溶解，待用。用不完的試劑4℃保存一周。
3. 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的建立：取60mL標(biāo)準(zhǔn)液和240mL現(xiàn)配的工作液混勻，95℃水浴10 min，（蓋緊，防止水分散失）自然冷卻室溫，取200mL比色皿或酶標(biāo)板中，在620nm處測(cè)吸光值A(chǔ)。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)樣本的濃度（y）和吸光度（x）建立標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
4. 樣本測(cè)定：取60mL樣本和240mL現(xiàn)配的工作液混勻，95℃水浴10 min，（蓋緊，防止水分散失）自然冷卻室溫，取200mL比色皿或酶標(biāo)板中，在620 nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度值為A。

若吸光值大于1，請(qǐng)將樣本用提取液適當(dāng)稀釋。后計(jì)算時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。 
三、海藻糖含量計(jì)算：
使用微量比色皿時(shí)，計(jì)算公式如下：
1、根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣本中海藻糖的含量y（mg/mL）。
2、按樣本鮮重計(jì)算：
海藻糖含量(mg/g 鮮重)= V1×y÷(W×V1÷V2)=y ÷W。
3、按樣本蛋白濃度計(jì)算：
海藻糖含量(mg/mg prot)=V1×y÷(V1×Cpr)=y÷Cpr。
4、按細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量計(jì)算：
海藻糖含量(μg/10⁴ cell)=1000 × V1 × y÷(500 × V1÷V2)=2× y
5、血清（漿）海藻糖含量計(jì)算
海藻糖含量（mg/mL）＝V1×y÷(V3×V1÷V2)=10×y
V1: 反應(yīng)體系中樣本體積，0.06mL；V2：提取液總體積，1mL；V3：血清、血漿體積，0.1mL；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；500：細(xì)胞或細(xì)菌總數(shù)，500萬(wàn)；1000:單位換算系數(shù)，1mg/mL=1000mg/mL。
 注意：低檢測(cè)限為10μg/g 鮮重或0.1μg/mg prot。

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海藻糖含量檢測(cè)試劑盒