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的試劑,良好的儀器和正確的操作是保證大鼠甘露糖結(jié)合蛋白(MBL)ELISA試劑盒檢測結(jié)果準確可靠的必要條件。大鼠甘露糖結(jié)合蛋白(MBL)ELISA試劑盒的操作因固相載體的形成不同而有所差異,國內(nèi)醫(yī)學檢驗一般均用板式點。本文將敘述板式ELISA各個操作步驟的注意要點,珠式、管式及磁性球ELSIA,國外試劑均與特殊儀器配合應用,兩者均有詳細的使用說明,嚴格遵照規(guī)定操作,必能得出準確的結(jié)果。
大鼠甘露糖結(jié)合蛋白(MBL)ELISA試劑盒操作步驟:
1.標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設(shè)標準品孔10孔,在*、第二孔中分別加標準品100μl,然后在*、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為1200ng/L,800 ng/L ,400 ng/L,200ng/L, 100 ng/L)。
2. 大鼠甘露糖結(jié)合蛋白(MBL)ELISA試劑盒加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
8.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
9.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
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xyA653Hu 【中文名稱】:人骨形成蛋白1(BMP1)ELISA試劑盒 【英文名稱】:ELISA Kit for Bone Morphogenetic Protein 1 (BMP1) 規(guī)格:96T/48T
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xyA267Hu 【中文名稱】:人組織蛋白酶K(CTSK)ELISA試劑盒 【英文名稱】:ELISA Kit for Cathepsin K (CTSK) 規(guī)格:96T/48T
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xyA069Hu 【中文名稱】:人N-乙酰β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)ELISA試劑盒 【英文名稱】:ELISA Kit for N-AHZtyl Beta-D-Glucosaminidase (NAGase) 規(guī)格:96T/48T
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xyA294Ge 【中文名稱】:人谷胱甘肽(GSH)ELISA試劑盒 【英文名稱】:ELISA Kit for Glutathione (GSH) 規(guī)格:96T/48T
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