曲霉屬通用PCR試劑盒

Aspergillus spp. 

產(chǎn)品及特點(diǎn)

曲霉屬，曲霉目中的一屬，包括米曲霉、黑曲霉等。一方面有很多菌種可 被用于各種有益物質(zhì)的生產(chǎn)，如用于蛋白消化劑的蛋白酶（醬油曲霉）、檸檬 酸（黑曲霉）、衣康酸（土曲霉、解烏頭酸曲霉）以及曲酸（黃曲霉）等。但另 一方面，也有不少侵害家禽、家畜甚至人體內(nèi)臟特別是呼吸器官的病菌，如引 起曲霉癥的煙曲霉等。因此快速靈敏檢測(cè)曲霉屬具有重要意義。本產(chǎn)品是根據(jù) PCR 原理開發(fā)的曲霉屬通用檢測(cè)試劑盒，它具有下列特點(diǎn)： 

1. 即開即用，用戶只需要提供 DNA 模板。

2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化，專一性強(qiáng)，只擴(kuò)增曲霉屬，與其他病原沒有交叉反應(yīng)。

3. 提供陽性對(duì)照，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次，但只能用于科研。 

曲霉屬通用PCR試劑盒規(guī)格及成分

運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽性對(duì)照需要單獨(dú)放置，不要污染其 他試劑。

自備試劑 樣品 DNA。

使用方法 一、樣品 DNA 的制備

1. 用自選方法純化 N+2 個(gè)樣品的 DNA，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)核酸提取 試劑盒兼容。

2. 如果有 N 個(gè)樣品，則需要做 N+2 個(gè)提取，包括一個(gè)樣品制備陽性對(duì)照和一 個(gè)樣品制備陰性對(duì)照。樣品制備陽性對(duì)照是在適量水（取決于試劑盒要求 的樣品起始量）中加 10μL 曲霉屬通用 PCR 陽性對(duì)照的 100 倍稀釋液而 得，樣品制備陰性對(duì)照是直接用水。提取結(jié)束后后得到模板 DNA 放冰上 待用。 

二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40 μL 體系）

3. 對(duì) N+2 個(gè)樣品，在 PCR 時(shí)需要增加一個(gè) PCR 陽性對(duì)照和一個(gè) PCR 陰性 對(duì)照，故需要設(shè)置 N+4 個(gè)反應(yīng)。在 N+4 個(gè) PCR 管中分別加入下列成分： 

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)

三、電泳檢測(cè)

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測(cè) PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 471bp。陽性對(duì)照必須有此條帶出現(xiàn)，陰性對(duì)照必須無任何擴(kuò) 增，否則實(shí)驗(yàn)無效。對(duì)沒有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染。