蠟樣芽胞桿菌PCR試劑盒

Bacillus cereus

產(chǎn)品及特點(diǎn)

蠟樣芽孢桿菌（Bacillus cereus），又稱(chēng)仙人掌桿菌，是一種革蘭氏陽(yáng)性 菌，β溶血性的桿狀細(xì)菌。蠟樣芽孢桿菌是兼性厭氧性。經(jīng)常在土壤和食物中被 發(fā)現(xiàn)，有些菌株會(huì)引起食物中毒，例如"炒飯綜合癥"；另外一些菌株則對(duì)其他 動(dòng)物有益，可產(chǎn)生抗菌物質(zhì)，抑制有害微生物的繁殖，降解土壤中的營(yíng)養(yǎng)成分， 改善生態(tài)環(huán)境?？僧a(chǎn)生細(xì)菌蛋白酶；可用于麻脫膠，是各種抗生素抗菌活性的 測(cè)定菌?？捎糜诿髂z液化，牛奶胨化，還原硝酸鹽，水解淀粉。因此快速靈敏 檢測(cè)蠟樣芽胞桿菌具有重要意義。本產(chǎn)品就是為此目的根據(jù) PCR 原理開(kāi)發(fā)的試 劑盒，它具有下列特點(diǎn)：

1. 即開(kāi)即用，用戶(hù)只需要提供 DNA 模板。

2. 引物經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化，專(zhuān)一性強(qiáng)，只擴(kuò)增蠟樣芽胞桿菌，與其他微生物沒(méi)有 交叉反應(yīng)。

3. 提供陽(yáng)性對(duì)照，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次，但只能用于科研。

蠟樣芽胞桿菌PCR試劑盒規(guī)格及成分

運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽(yáng)性對(duì)照需要單獨(dú)放置，不要污染其 他試劑。  

自備試劑 樣品 DNA。

使用方法 一、樣品 DNA 的制備

1. 用自選方法純化 N+2 個(gè)樣品的 DNA，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)核酸提取 試劑盒兼容。

2. 如果有 N 個(gè)樣品，則需要做 N+2 個(gè)提取，包括一個(gè)樣品制備陽(yáng)性對(duì)照和一 個(gè)樣品制備陰性對(duì)照。樣品制備陽(yáng)性對(duì)照是在適量水（取決于試劑盒要求 的樣品起始量）中加 10μL 蠟狀芽孢桿菌 PCR 陽(yáng)性對(duì)照的 10000 倍稀釋 液而得，樣品制備陰性對(duì)照是直接用水。提取結(jié)束后后得到模板 DNA 放 冰上待用。

二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）

3. 對(duì) N+2 個(gè)樣品，在 PCR 時(shí)需要增加一個(gè) PCR 陽(yáng)性對(duì)照和一個(gè) PCR 陰性 對(duì)照，故需要設(shè)置 N+4 個(gè)反應(yīng)。在 N+4 個(gè) PCR 管中分別加入下列成分： 

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：

三、電泳檢測(cè)

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測(cè) PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽(yáng) 性對(duì)照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn)，陰性對(duì)照必須無(wú)任何擴(kuò)增，否則實(shí) 驗(yàn)無(wú)效。對(duì)沒(méi)有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染。