枯草芽孢桿菌PCR試劑盒

Bacillus subtilis

產(chǎn)品及特點(diǎn)

枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)是芽孢桿菌屬的一種，它們對外界有害因 子抵抗力強(qiáng)，分布廣，存在于土壤、水、空氣以及動(dòng)物腸道等處，具有繁殖快 速、生命力強(qiáng)、耐強(qiáng)酸、耐強(qiáng)堿、抗菌消毒、耐高氧（嗜氧繁殖）、耐低氧 （厭氧繁殖）等特點(diǎn)，枯草芽孢桿菌在生物肥發(fā)酵或發(fā)酵床制作中應(yīng)用相當(dāng) 廣泛，可用于畜牧水產(chǎn)飼料添加劑、用于水環(huán)境凈化，是一種多功能的微生 物，也可以與多種菌種混配，在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中具有重要作用，還可以幫助消化， 是一種消化道益生菌，因此快速檢測枯草芽孢桿菌具有重要意義。本產(chǎn)品是 根據(jù) PCR 原理開發(fā)的鉤端螺旋體的檢測試劑盒，它具有下列特點(diǎn)：

1. 即開即用，用戶只需要提供細(xì)菌 DNA 模板。

2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化，專一性強(qiáng)，只擴(kuò)枯草芽孢桿菌，與其他病原沒有交叉 反應(yīng)。

3. 提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次。

6. 本產(chǎn)品只能用于科研。

枯草芽孢桿菌PCR試劑盒規(guī)格及成分

運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽性對照需要單獨(dú)放置，不要污染其 他試劑。  

自備試劑 樣品 DNA。

使用方法 一、樣品 DNA 的制備

1. 用自選方法純化 N+2 個(gè)樣品的 DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)核酸提取 試劑盒兼容。

2. 如果有 N 個(gè)樣品，則需要做 N+2 個(gè)提取，包括一個(gè)樣品制備陽性對照和一 個(gè)樣品制備陰性對照。樣品制備陽性對照是在適量水（取決于試劑盒要求 的樣品起始量）中加 10μL 枯草芽孢桿菌 PCR 陽性對照的 10000 倍稀釋 液而得，樣品制備陰性對照是直接用水。提取結(jié)束后后得到模板 DNA 放 冰上待用。

二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）

3. 對 N+2 個(gè)樣品，在 PCR 時(shí)需要增加一個(gè) PCR 陽性對照和一個(gè) PCR 陰性 對照，故需要設(shè)置 N+4 個(gè)反應(yīng)。在 N+4 個(gè) PCR 管中分別加入下列成分： 

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：

三、電泳檢測

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽 性對照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn)，陰性對照必須無任何擴(kuò)增，否則實(shí) 驗(yàn)無效。對沒有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染。