球孢白僵菌PCR試劑盒

Beauveria bassiana

產(chǎn)品及特點

球孢白僵菌（Beauveria bassiana）屬于子囊菌門、肉座菌目、蟲草菌科、 白僵菌屬，是廣譜性昆蟲病原真菌，主要進行無性繁殖，產(chǎn)生分生孢子;可進 行有性生殖并產(chǎn)生子實體，被鑒定為球孢蟲草。球孢白僵菌在世界范圍被用 于害蟲生物防治，其中我國使用球孢白僵菌防治馬尾松毛蟲和玉米螟是 上大的害蟲防治項目，取得良好的害蟲持續(xù)控制效果。球孢白僵菌也能感 染家蠶等經(jīng)濟昆蟲，感染家蠶幼蟲干燥后的尸體稱為僵蠶。入藥能祛風、鎮(zhèn) 驚等。由于加強防治，近年來白僵菌對家蠶的感染大為減少，為解決僵蠶的 藥源問題，以蠶蛹為原料，接入白僵菌，所得蠶蛹可代僵蠶用。本產(chǎn)品是根 據(jù) PCR 原理開發(fā)的球孢白僵菌檢測試劑盒，它具有下列特點：

1. 即開即用，用戶只需要提供 DNA 模板。

2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化，專一性強，只擴球孢白僵菌，與其他病原沒有交叉反 應。。

3. 提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次，但只能用于科研。

球孢白僵菌PCR試劑盒規(guī)格及成分

運輸及保存 低溫運輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置，不要污染其 他試劑。  

自備試劑 樣品 DNA。

使用方法 一、樣品 DNA 的制備

1. 用自選方法純化 N+2 個樣品的 DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)核酸提取 試劑盒兼容。

2. 如果有 N 個樣品，則需要做 N+2 個提取，包括一個樣品制備陽性對照和一 個樣品制備陰性對照。樣品制備陽性對照是在適量水（取決于試劑盒要求 的樣品起始量）中加 10μL 蠟狀芽孢桿菌 PCR 陽性對照的 10000 倍稀釋 液而得，樣品制備陰性對照是直接用水。提取結束后后得到模板 DNA 放 冰上待用。

二、設置 PCR 反應（40μL 體系）

3. 對 N+2 個樣品，在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性 對照，故需要設置 N+4 個反應。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分： 

4. 按下表設置 PCR 反應：

三、電泳檢測

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴增結束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽 性對照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn)，陰性對照必須無任何擴增，否則實 驗無效。對沒有擴增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復 PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染。