雙歧桿菌屬通用PCR試劑盒

Bifidobacterium spp.

產(chǎn)品及特點(diǎn)

雙歧桿菌（Bifidobacterium）是一類存在于人體中非常重要的專性厭氧 菌，于 1899 年首先在母乳喂養(yǎng)的健康嬰兒糞便中發(fā)現(xiàn)并分離，研究證實(shí)雙歧 桿菌具有平衡腸道菌群、降膽固醇、延緩衰老及抗腫瘤等生理功能，是人體益 生菌群的主要組成。添加雙歧桿菌的微生態(tài)制劑開發(fā)研究已成為一大熱點(diǎn)，廣 泛應(yīng)用于食品、保健和醫(yī)療等領(lǐng)域。但不斷有報(bào)道指出國內(nèi)外市場上雙歧桿菌 微生態(tài)制劑標(biāo)示名稱混亂，很多國家市場上雙歧桿菌制品假冒代替現(xiàn)象嚴(yán)重。 本產(chǎn)品是根據(jù) PCR 原理開發(fā)的雙歧桿菌屬通用型檢測試劑盒，它具有下列特 點(diǎn)：

1. 即開即用，用戶只需要提供 DNA 模板。

2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化，專一性強(qiáng)，只擴(kuò)增雙歧桿菌屬，與其他微生物沒有交 叉反應(yīng)。

3. 提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次，但只能用于科研。 

雙歧桿菌屬通用PCR試劑盒規(guī)格及成分

運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽性對照需要單獨(dú)放置，不要污染其 他試劑。  

自備試劑 樣品 DNA。

使用方法 一、樣品 DNA 的制備

1. 用自選方法純化 N+2 個(gè)樣品的 DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)核酸提取 試劑盒兼容。

2. 如果有 N 個(gè)樣品，則需要做 N+2 個(gè)提取，包括一個(gè)樣品制備陽性對照和一 個(gè)樣品制備陰性對照。樣品制備陽性對照是在適量水（取決于試劑盒要求 的樣品起始量）中加 10μL 芽孢桿菌通用 PCR 陽性對照的 10000 倍稀釋 液而得，樣品制備陰性對照是直接用水。提取結(jié)束后后得到模板 DNA 放 冰上待用。 

二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）

3. 對 N+2 個(gè)樣品，在 PCR 時(shí)需要增加一個(gè) PCR 陽性對照和一個(gè) PCR 陰性 對照，故需要設(shè)置 N+4 個(gè)反應(yīng)。在 N+4 個(gè) PCR 管中分別加入下列成分： 

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：

三、電泳檢測

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽 性對照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn)，陰性對照必須無任何擴(kuò)增，否則實(shí) 驗(yàn)無效。對沒有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染。