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上海信裕生物科技有限公司
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人類內源性逆轉錄病毒RT-PCR試劑盒

參   考   價: 1990 1790

訂  貨  量: 1-4  臺 ≥5  臺

具體成交價以合同協(xié)議為準

產品型號50次

品       牌其他品牌

廠商性質生產商

所  在  地上海

更新時間:2020-08-03 14:19:06瀏覽次數(shù):453次

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供貨周期 一周 規(guī)格 50T
貨號 XY-0383 應用領域 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產業(yè),農業(yè)
主要用途 熒光定量PCR具有更高的擴增效率、更高的擴增靈敏度、更高的擴增特異性。
人類內源性逆轉錄病毒RT-PCR試劑盒是群中等小的雙股 DNA 病毒,根據其理化性質分 α、β、γ、未分類皰疹病毒四個亞科。皰疹病毒感染的宿主范圍廣泛,可感染人類和其他脊椎動物。在自然界廣泛存在,主要侵犯外胚層發(fā)育而成的組織,例如:皮膚、粘膜和神經組織。

人類內源性逆轉錄病毒RT-PCR試劑盒

Human Endogenous Retroviruses(HERV)

產品及特點

人類內源性逆轉錄病毒(HERV)是幾百萬年前整合到人類基因組中的逆轉錄 病毒的殘余物,約占了整個基因組的 8%。大部分 HERV 元件在進化過程中由于 突變、缺失等的積累,已沒有編碼能力。但仍有少數(shù)由于正性選擇的壓力,完整 的開放閱讀框被保留了下來。它們在一些特定的組織或分化發(fā)育的特定階段表 面,可能具有重要的生理意義。本產品根據 PCR 原理開發(fā),可用于科研領域快 速檢測人類內源性逆轉錄病毒。它具有下列特點:

1. 一站式,用于不需要單獨準備每種成分,包括引物和對照。

2. 根據人類內源性逆轉錄病毒的保守基因序列設計的引物,具有良好的特異性。

3. 靈敏度可以達到 1000 拷貝/反應。

4. 使用一管式 RT-PCR 技術,RT 和 PCR 兩步在一個試管內完成,不需要中間 轉移樣品,降低了操作誤差和可能的污染。

5. 本產品足夠 50 次 20μL 體系的 RT-PCR。

6. 本產品只能用于科研,不能用于臨床。

人類內源性逆轉錄病毒RT-PCR試劑盒規(guī)格及成分

編號

成  份

規(guī)格

試劑一

5×雙酶一管式 RT-PCR Buffer

200 μL(橘黃蓋)

試劑二

MMLV-Taq Mix

75 μL(紅蓋)

試劑三

超純水 

1 mL(亮黃蓋)

試劑四

人類內源性逆轉錄病毒 RT-PCR 引物混合液 

100 μL(白蓋)

試劑五

人類內源性逆轉錄病毒 RT-PCR 陽性對照(1×10E8 拷貝/μL)

50 μL(黃蓋)

試劑六 天凈沙核酸釋放劑(試用裝) 20 次(1mL,綠蓋)
試劑七

使用手冊 

1 份

運輸及保存 低溫運輸,-20℃保存,保存期限為 12 個月。收到貨后陽性對照需要跟其他成分 分開放置,因為其容易污染其他成分,造成假陽性。 

自備試劑 樣品 RNA

使用方法 一、樣品 RNA 的制備

1. 如果有 N 個樣品,必須設置 N+2 個提取,多出的一個是 PC(樣品制備陽性 對照),一個是 NC(樣品制備陰性對照)??梢杂?10μL 流行性出血熱病毒 PCR 陽性對照的 100 倍稀釋作為制備的陽性對照;用水作為制備的陰性對照。 制備所得成為樣品 RNA。

2. 用自選方法純化 N+2 個樣品的 RNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒 RNA 提 取試劑盒兼容。

二、設置 RT-PCR 反應(20μL 體系)

3. 如果有 N+2 個樣品,則標記 N+4 個 PCR 管(額外增加的兩個管一個是 RT-PCR 陽性對照,另一個是 RT-PCR 陰性對照)并按照下表在 PCR 管中 加入下列成分:

成分

樣品

陽性對照

陰性對照

5×雙酶一管式 RT-PCR Buffer

各 4 μL

4 μL

4 μL

人類內源性逆轉錄病毒 RT-PCR 引物 混合液

2μL

2μL

2μL

N+2 個制備的 RNA 樣品

各12.5 μL

 

 

超純水 

 

12.5 μL

 

人類內源性逆轉錄病毒 RT-PCR 陽性 對照的 10000 倍稀釋液

 L

 

12.5 μL

 MMLV-Taq Mix 1.5 μL  1.5 μL 1.5 μL

4. 上機進行 RT-PCR,RT-PCR 反應參數(shù)為:

過程

溫度

時間

逆轉錄 

42℃

30 min

預變性

95℃  

5 min

PCR 反應 (35 個循環(huán))

95℃ 

30 sec

53℃ 

30 sec

72

20 sec

 延伸  72 7 min

5. 瓊脂糖電泳檢測擴增效果。如果陰性對照有擴增產物或陽性對照無擴增產物, 則說明實驗失敗,需要分析實驗失敗的原因。只有在陰性對照沒有擴增產物、 陽性對照有 122bp 預期的擴增產物的情況下,才有必要分析樣品的實驗結果, 如果有擴增產物則為陽性,如果無則為陰性。

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