新加坡石斑魚虹彩病毒PCR試劑盒

Singapore Grouper Iridovirus(SGIV)

產(chǎn)品及特點

新加坡石斑魚虹彩病毒(Singapore Grouper Iridovirus，SGIV)是一種 DNA 病毒，感染后主要是會造成造血織組壞死，傳染方式主要是以水平感染為 主，該病的外觀臨床癥狀一般包括：體表無明顯損傷，嗜睡，游泳異常；貧血 癥狀明顯，血液稀薄、色淡，凝固性差，鰓外觀呈暗灰色；腎臟失血，呈灰白 色等。但病魚的臨床癥狀也存在一定的差異，該病毒的感染對養(yǎng)魚業(yè)造成嚴重 損害，因此新加坡石斑魚虹彩病毒的快速準確鑒定對該病的預防和檢疫有著重 要作用。本產(chǎn)品就是基于 PCR 技術的快速診斷產(chǎn)品，它具有下列特點： 

1. 即開即用，用戶只需要提供病毒 DNA 模板。

2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化，專一性強，只擴增新加坡石斑魚虹彩病毒，與其他病 毒沒有交叉反應。 

3. 提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次，但只能用于科研。

新加坡石斑魚虹彩病毒PCR試劑盒規(guī)格及成分

運輸及保存 低溫運輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置，不要污染其 他試劑。 

自備試劑 樣品 DNA。

使用方法 一、樣品 DNA 的制備

1. 如果有 N 個樣品，必須設置 N+2 個提取，多出的一個是 PC（樣品制備陽 性對照），一個是 NC（樣品制備陰性對照）?？梢杂?10μL 陽性對照的 1 千倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此 作為 PC。另外用水作為 NC。

2. 用自選方法純化樣品的 DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)寄生蟲 DNA 提取 試劑盒兼容。 

二、設置 PCR 反應（40μL 體系）

3. 對 N+2 個樣品，在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性 對照，故需要設置 N+4 個反應。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分： 

4. 按下表設置 PCR 反應：

三、電泳檢測

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴增結束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽 性對照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn)，陰性對照必須無任何擴增，否則實 驗無效。對沒有擴增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復 PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染。