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MC3T3-E1(小鼠胚胎成骨細胞)

參   考   價: 1500

訂  貨  量: ≥1 瓶

具體成交價以合同協(xié)議為準

產(chǎn)品型號

品       牌信裕生物

廠商性質生產(chǎn)商

所  在  地上海市

更新時間:2025-04-17 11:36:10瀏覽次數(shù):43次

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純度 99.9 供貨周期 一周
規(guī)格 1*10^6cells/T25 貨號 XY-M044
應用領域 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農林牧漁 主要用途 僅用于科研
MC3T3-E1(小鼠胚胎成骨細胞) 從克隆的但是表型各異的MC3T3-E1細胞系中分離出一系列亞克隆。從含抗壞血酸培養(yǎng)基生長的成骨細胞中選擇高或低成骨細胞分化、礦化的亞克隆。

MC3T3-E1(小鼠胚胎成骨細胞

Mouse Embryonic Osteoblasts Cells

規(guī)格:T25或1mL凍存管 形態(tài):成纖維細胞樣,貼壁生長

培養(yǎng)基:90%DMEM+10%FBS+P/S

傳代:1:2至1:3,每周 3次

MC3T3-E1(小鼠胚胎成骨細胞)   

一、細胞基本屬性
細胞名稱小鼠胚胎成骨細胞MC3T3-E1
細胞別稱MC3T3-E1,小鼠胚胎成骨細胞
種屬來源小鼠
組織來源胚胎
生長特性貼壁生長
細胞形態(tài)成纖維細胞樣
細胞類型正常細胞
背景介紹

 

從克隆的但是表型各異的MC3T3-E1細胞系中分離出一系列亞克隆。從含抗壞血酸培養(yǎng)基生長的成骨細胞中選擇高或低成骨細胞分化、礦化的亞克隆。MC3T3亞克隆4(ATCC CRL-2593)和MC3T3亞克隆14(ATCC CRL-2594)在抗壞血酸和3到4mM無機磷酸鹽中生長表現(xiàn)出高水平的成骨細胞分化。它們10天后形成一個礦化良好的細胞外基質(ECM)。

MC3T3亞克隆24(ATCC CRL-2595)和MC3T3亞克隆30(ATCC CRL-2596)在抗壞血酸中生長表現(xiàn)出很差的成骨細胞分化。不形成ECM,可以作為亞克隆4和14的陰性對照。礦化的亞克隆選擇的表達作為成骨細胞標記的mRNA,及唾液酸糖蛋白(BSP),骨鈣素(OCN),和甲狀旁腺激素/甲狀旁腺激素相關蛋白受體的mRNA。

高或者低的分化潛能的亞克隆在培養(yǎng)中生產(chǎn)出相似數(shù)量的膠原質,表達可比較的基本水平的mRNA編碼Osf2/Cbfa1,一種成骨細胞相關轉錄因子。植入免疫缺陷小鼠以后,高分化性的亞克隆形成與骨類似的形成小骨的編織骨,低分化細胞只是產(chǎn)生纖維組織。這些細胞系是研究體外成骨細胞分化的好模型,尤其是ECM信號。它們和原代培養(yǎng)顱頂成骨細胞的行為類似。

細胞規(guī)格1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測
培養(yǎng)基90%DMEM+10%FBS+P/S
培養(yǎng)條件氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
凍存條件無血清凍存液,液氮儲存
細胞貨期1-2周
運輸方式復蘇發(fā)貨(T25瓶免運輸費用)/  凍存發(fā)貨(需加干冰運輸費用) 順豐快遞
供應限制僅限于科學研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
  二、細胞培養(yǎng)操作
收貨方式T25瓶凍存管
收貨處理觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁,將T25瓶置于37度培養(yǎng)箱放置2-3h,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)收到細胞后,需立即轉入液氮凍存或直接復蘇
傳代密度細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)第二天換液并檢查細胞密度
傳代比例傳代建議1:2傳代
 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿
一管細胞建議接種到10cm培養(yǎng)皿或者T25瓶
傳代方法a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02%EDTA)于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤所有細胞,棄去消化液,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-3 min,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
c、按6-8 mL/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心4 min,棄去上清液,補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入10 cm皿中,加入約8 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
注意事項

1.運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 

2.因運輸問題,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。

1.收貨時若發(fā)現(xiàn)干冰化完,檢查凍存管是否融化,若已融化需直接離心細胞接種觀察,若未融化可以將細胞按正常步驟保存;
2.為保證細胞的高存活率,收到產(chǎn)品后,請立即解凍復蘇細胞。

到貨須知

1.收到細胞后,首先觀察并拍照記錄細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,干冰運輸?shù)募毎麢z查干冰是否揮發(fā),細胞是否解凍,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2.靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照(當天以及第 2,3 天請拍照),記錄細胞狀態(tài) (所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù));建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。

3.由于運輸?shù)脑?,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。
4.仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等,確保細胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題,責任由客戶自行承擔。

  三.細胞凍存操作
凍存液配方無血清凍存液,液氮儲存
細胞密度待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例
凍存方法a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進行細胞計數(shù)。
b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液,使細胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細胞懸液,注意凍存管做好標識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
注意事項凍存細胞轉入液氮后及時復蘇一管檢查細胞凍存活性,若有異常,及時調整實驗方案
  四、售后服務
重發(fā)標準

1.細胞運輸途中遭遇的各種問題,細胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴重漏液等,重發(fā);

2.收到細胞未開封,如出現(xiàn)污染狀況,重發(fā);

3.收到細胞3天內,發(fā)現(xiàn)污染問題,經(jīng)核實后,重發(fā);

4.常溫發(fā)貨的細胞靜置 2 小時后,干冰凍存發(fā)貨的細胞復蘇 2 天后,絕大多數(shù)細胞未存活,經(jīng)核實后,重發(fā);

5.常溫發(fā)貨的細胞靜置 22 小時并且未開封或干冰凍存發(fā)貨的細胞復蘇 2 天后,出現(xiàn)污染,經(jīng)核實后,重發(fā);

6.細胞活性問題,請在收到產(chǎn)品 3 天內給我們提出真實的實驗結果,用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,經(jīng)核實后,重發(fā);

7.視具體情況而定。

不予重發(fā)

1.客戶操作造成細胞污染,不重發(fā);

2.客戶嚴重操作失誤致細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);

3.非我們推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);

4.細胞狀態(tài)不好,未提供真實清晰的培養(yǎng)前 3 天的細胞狀態(tài)照片,不重發(fā);

5.細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理導致細胞出現(xiàn)問題的,不重發(fā);

6.收到細胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的,不重發(fā);

7.視具體情況而定。



僅用于科研,不能用于臨床診斷!所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于人或動物的治療等任何其他用途,不為任何個人提供產(chǎn)品和服務。以實際收貨產(chǎn)品說明書為準,網(wǎng)站說明書僅供參考。

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