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詳細介紹
AMV來源重組逆轉錄酶
本產品是來源于大腸桿菌表達的Avian Myeloblastosis Virus（AMV）的重組逆轉錄酶，酶活性高，能夠高靈敏度地檢測出RNA。
該酶在引物存在時，以單鏈RNA和單鏈DNA作為模板合成DNA。由于它具有解鏈活性和分解雙鏈RNA-DNA中RNA的RNase H活性，因此可以高效地進行RT-PCR?？蓱糜趂irst strand cDNA合成、制備cDNA探針、RT-PCR。
◆特點
● 高靈敏度檢測RNA
● 長鏈RNA的逆轉錄
● 熱穩(wěn)定性高
● GC-rich RNA的逆轉錄
◆應用
● RT-LAMP法
● 合成first strand cDNA
● 制備cDNA探針
● 應用于RT-PCR
來源 | Escherichia coli (Recombinant) |
活性 | 20 units/μL |
反應溫度 | 42°C-65°C |
單位定義 | 1 unit指以poly(A)/(dT)15為模板/底物，在37°C，10 min的條件下將1 nmol 的脫氧核糖核苷酸攝入酸不溶性沉淀物中的活性 |
純度試驗 | DNase試驗、RNase試驗 |
◆產品組成
AMV Reverse Transcriptase （500 units）
組成內容 | 包裝 | 儲存 | 備注 |
AMV Reverse Transcriptase (20 units/μL) | 500 units × 1 | -20°C | 200 mmol/L磷酸鈣（pH 7.2，25°C）， 2 mmol/L DTT、0.2% Triton X-100, 50% Glycerol |
5xAMV RT Reaction Buffer | 1 mL× 1 | -20°C | 250 mmol/LTris-HCl（pH 8.5，25°C）、 150 mmol/LKCl, 40 mmol/L MgCl2 |
◆應用實例
實驗案例 Isothermal Master Mix合用（高靈敏檢測RNA）
用ISOGEN從感染瓜類褪綠黃化病毒（簡稱CCYV）的蜜瓜葉中提取RNA，將提取的RNA溶液作為模板使用。用等溫基因擴增試劑Isothermal Master Mix和一組引物擴增目標區(qū)域，然后用等溫擴增熒光檢測裝置Genie® II檢測出了CCYV RNA。
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<反應條件>
Isothermal Master Mix 15 μL
AMV RT 0.25 units
引物 2.5 μL
模板RNA 2 μL
反應體積 25 μL
擴增： 63°C 30 min
※ 檢測瓜類褪綠黃化病毒的引物為獨立行政法人農業(yè)、食品產業(yè)技術綜合研究機構九州沖繩農業(yè)研究中心在推進新農林水產政策的實用
※ 技術開發(fā)產業(yè)“開發(fā)以粉虱為媒介的新型瓜類蔬菜病毒病的綜合性防治技術系統(tǒng)”中開發(fā)的產品。
結果
由于Isothermal Master Mix中含有的DNA聚合酶具有逆轉錄活性，即使不添加逆轉錄酶也能檢測出RNA，但通過添加本產品，可提高檢測速度。另外，模板RNA量為0.5 ng時也能使目標區(qū)域擴增（綠色實線）。
備注
本產品為實驗研究用試劑。不可作為醫(yī)藥品使用。
◆產品列表
產品編號 | 產品名稱 | 包裝 |
311-07501 | AMV逆轉錄酶 | 500 units |
◆相關產品
產品編號 | 產品名稱 | 包裝 |
316-08151 | GeneAce Reverse Transcriptase | 10,000 units |
312-08153 | 10,000 units × 5 | |
313-08161 | M-MLV Reverse Transcriptase | 10,000 units |
319-08163 | 10,000 units × 5 |
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