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注意事項:
１．PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。設(shè)立一個的PCR實驗室。
２．純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結(jié)果，純化的方法越簡單越好。
３．所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。產(chǎn)品僅用于科研操作過程中均應(yīng)戴手套。
４．PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
５．試劑都應(yīng)該以大體積配制，試驗一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量儲存，從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
６．試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
７．PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開，并且要充分混勻。
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：副結(jié)核分支桿菌PCR檢測試劑盒價格
英文名稱：Mycobacterium paratuberculosisPCR
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點：
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
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PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，產(chǎn)品僅用于科研按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR實驗步驟:
產(chǎn)品僅用于科研典型的PCR由（1）高溫變性模板；（2）引物與模板退火；（3）引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個循環(huán)，通過多次循環(huán)反應(yīng)，使目的DNA得以迅速擴增。其主要步驟是：
將待擴增的模板DNA置高溫下（通常為93℃-94℃）使其變性解成單鏈；
人工合成的兩個寡核苷酸引物在其合適的復性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補結(jié)合，兩個引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴增片段的長短；
耐熱的DNA聚合酶（Taq酶）在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入，以目的基因為模板從5’→3’方向延伸，合成DNA的新互補鏈。
副結(jié)核分支桿菌PCR檢測試劑盒價格原理是由一對引物介導，能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增，經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增，擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0＜E＜1,擴增效率＝倍，使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。
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甲基硅油I/甲基硅油201-350/Methylsilicone oil I色固100克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，RT

碳酸鍶/菱鍶礦/Strontium carbonateAR，99%500克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，1633-05-2RT

硫酸鍶/天青石/大青石/鍶礦/Strontium sulfateAR500克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，CAS：7759-02-6RT

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三氧化二鎳/黑色氧化鎳/氧化高鎳/氧化鎳/過氧化鎳/氧化鎳黑/Nickelic oxideCP，70%250克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，1314-06-3RT

堿式碳酸鎳/碳酸鎳/[碳酸(2-)]四羥基三鎳/碳酸鎳氫氧化物/Nickel(II) carbonate basic tetrahydrateAR，44%250克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，12607-70-4RT

氟化鎳/二氟化鎳/氟化亞鎳/四水合氟化鎳(II)/Nickel(II) fluoride tetrahydrateCP，30%250克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，13940-83-5RT

草酸鎳/乙二酸鎳/草酸鎳(II)二水合物/Nickel oxalate dihydrateBR，31%50克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，6018-94-6RT

氧化鍺/二氧化鍺/氧化鍺(Ⅳ)/Germanium dioxide5N5克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，1310-53-8RT

氧化鉿/二氧化鉿/氧化鉿(IV)/Hafnium dioxideBR100克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，12055-23-1RT

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副結(jié)核分支桿菌PCR檢測試劑盒價格Poly(styrene) 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

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