目錄:上海一研生物科技有限公司>>細(xì)胞分析>>細(xì)胞因子及蛋白 /細(xì)胞因子>> 重組小鼠白介素-5,His-標(biāo)簽無動物源IL-5
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5 μg/20 μg/100 μg/1 mg |
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貨號 | EY-01X8784 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研研究實驗 |
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | Mouse IL-5 Protein, His tag (Animal-Free) | |
規(guī)格 | 5 μg/20 μg/100 μg/1 mg | 貨號 | EY-01X8784 |
運(yùn)輸條件 | 藍(lán)冰運(yùn)輸 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
背景:
白細(xì)胞介素 5(IL-5)是一種 45-60 kDa 的同源二聚體細(xì)胞因子,主要在 Th2 反應(yīng)的嗜酸性粒細(xì)胞臂中發(fā)揮作用。它與 IL-3、IL-4 和粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)同屬于細(xì)胞因子螺旋束家族。
標(biāo)記:
1.將細(xì)胞培養(yǎng)基與EdU溶液按照500:1的比例混合,制成2×EdU標(biāo)記培養(yǎng)基。
2.提前將2×EdU標(biāo)記培養(yǎng)基預(yù)熱,然后將150微升2×EdU標(biāo)記培養(yǎng)基與等體積細(xì)胞培養(yǎng)基混合,獲得1×EdU溶液。
【注】:①不建議替換全部培養(yǎng)基,這樣可能會影響細(xì)胞增殖的速度。②配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配,用量以沒過細(xì)胞為宜。
3.孵育細(xì)胞2 h,棄培養(yǎng)基。
【注】:①培養(yǎng)時間取決于細(xì)胞的增殖速度和生長狀態(tài)。②大多數(shù)腫瘤細(xì)胞以及粘附細(xì)胞系均可采用2 h的孵育時間。
4.以1xPBS清洗細(xì)胞兩次,每次5 min, 以除去未摻入DNA的EdU殘留。
【注】:對于貼壁不牢的細(xì)胞可降低清洗強(qiáng)度。
實驗步驟:
1. 將細(xì)胞以 104-105 個細(xì)胞/孔的密度接種在 96 孔板 中,加入 100μL 培養(yǎng)基,含或不含待測化合物。在 CO2 培養(yǎng)箱中在 37℃ 下培養(yǎng)細(xì)胞 24 小時。
2. 向板中加入 10μL 不同濃度的待測物質(zhì)。
3. 在培養(yǎng)箱中將培養(yǎng)板培養(yǎng)適當(dāng)時間(如 6、12、24 或 48 小時)。
4. 向板的每個孔中加入 10μL CCK-8 溶液。小心不要將氣泡引入孔中。
5. 將平板在培養(yǎng)箱中孵育 1-4 小時。
6. 在讀板之前,在定軌振蕩器上輕輕混勻。
7. 使用酶標(biāo)儀測量 450nm 處的吸光度。
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