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目錄:上海一研生物科技有限公司>>ELISA試劑盒>>Rat/大鼠Elisa試劑盒>> Rat CACT Elisa試劑盒

Rat CACT Elisa試劑盒
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參考價1300-1900
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)

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規(guī)格

48T 96T

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供貨周期:現(xiàn)貨 規(guī)格:48T/96T 貨號:EY-00R1493 應(yīng)用領(lǐng)域:化工,生物產(chǎn)業(yè) 主要用途:僅供科研實(shí)驗(yàn)研究

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48T1300元15盒可售
96T1900元15盒可售

更新時間:2023-11-12 09:15:39瀏覽次數(shù):273評價

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 48T/96T
貨號 EY-00R1493 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn)研究 英文名稱 Rat carnitine-acylcarnitine translocase, CACT Elis
儲存條件 2-8℃防潮避光 特色服務(wù) 免費(fèi)代測
品牌 一研
Rat CACT Elisa試劑盒又稱為酶聯(lián)免疫試劑盒,用于對液體樣本中的目標(biāo)物質(zhì)進(jìn)行定性和定量檢測。

Rat CACT Elisa試劑盒

本試劑僅供研究使用  標(biāo)本:血清或血漿及相關(guān)液體

性能:

1. 靈敏度:最小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。

2. 特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。

3. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

原理:

采用雙抗體夾心法測定MTHFD2水平。用純化的MTHFD2抗體包被微孔板,制成固相載體,實(shí)驗(yàn)時依次在微孔板中加入樣本及標(biāo)準(zhǔn)品,并加入 HRP 標(biāo)記的 ABP 抗體,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,反復(fù)洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化為藍(lán)色,再用硫酸終止反應(yīng),轉(zhuǎn)變成黃色。顏色的深淺和樣品中的 ABP含量呈正相關(guān)。采用酶標(biāo)儀在 450nm 波長測定吸光度(OD 值),根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算測試樣品中 ABP 濃度。

試劑盒組成:

QQ截圖20231025103947.png

結(jié)果判斷與分析:

1、儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值

2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的待測物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的待測物質(zhì)含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。


6.jpg

4.png


ELISA試劑盒為什么要嚴(yán)格按照說明書操作?

一.先說最嚴(yán)重的操作錯誤,看錯或壓根不看試劑盒配套說明書,不按操作步驟加樣。比如把競爭法的試劑盒當(dāng)作雙抗體夾心法來做,導(dǎo)致的結(jié)果就是整板顯示很強(qiáng)的藍(lán)色,無任何梯度。

二.混用別的試劑盒里的試劑。不同廠家或者相同廠家的不同試劑盒,所含的試劑成分很可能是不一樣的,混用導(dǎo)致的結(jié)果是,浪費(fèi)珍貴的樣本,樣品的回收率達(dá)不到預(yù)期值,如果混用不同試劑盒的酶復(fù)合物,會導(dǎo)致顯色過弱或過強(qiáng),因?yàn)槊糠N試劑盒所用酶復(fù)合物效價可能不一樣。

三.不看文獻(xiàn)或者不做預(yù)實(shí)驗(yàn)。比如某個試劑盒按照其靈敏度范圍和文獻(xiàn)報道推算樣本應(yīng)該1:10稀釋,結(jié)果稀釋成1:1000,導(dǎo)致的結(jié)果是顯色過弱,結(jié)果不可用。

車.不校準(zhǔn)移液器及培養(yǎng)箱的溫度濕度。導(dǎo)致工作試劑濃度不準(zhǔn)確,孵育溫度不合適,實(shí)驗(yàn)帶來誤差。

五.洗滌不充分,每孔洗液加樣過少,或者殘留。導(dǎo)致的結(jié)果是顯色過快,同時背景較高。

六.手洗板時所用槍頭沒有懸空加入洗液,導(dǎo)致洗液污染,整個實(shí)驗(yàn)失敗。

七.剩余酶標(biāo)板條未及時放入干燥袋,導(dǎo)致酶標(biāo)板受潮,下一次再做時,顯色過弱或污染,CV值過高。

八.試劑盒保存條件不當(dāng)。試劑盒要求放4℃的,放在了-20℃?;蛘咭蠓?20℃的,放在了4℃。均會導(dǎo)致試劑盒敏感性下降。

以上只是最常見的操作錯誤。順利完成一次ELISA實(shí)驗(yàn)需要注意的細(xì)節(jié)很多,許多操作環(huán)節(jié)都影響到檢測的質(zhì)量。

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操作步驟:

1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘。

2. 分組:取出 96 孔板,根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn)

品組(6 個濃度)、空白孔、待測樣品組。

注:為減少實(shí)驗(yàn)誤差,保證準(zhǔn)確性,建議設(shè)置復(fù)孔。

3. 加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中;空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水;其余微孔中加入 50ul

的待測樣本。

4. 加酶標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液(空白對照孔除外)。

5. 溫育:酶標(biāo)板用封板紙密封后,放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時。

6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置 15-30s,充分清洗酶標(biāo)板 5 次,用吸水紙拍干。

7. 顯色:各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后,再加入顯色劑 B 液 50ul。

8. 終止:25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,加入 50ul 終止液。

9. 讀板:在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值。


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