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傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和生長密度，當細胞生長密度達到80%~90%時，即可進行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細胞，輕輕吹打混勻，使細胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間，甚至進行細胞凍存。

6-10B人鼻咽癌細胞系

細胞基本屬性：

細胞詳細介紹：

二、懸浮細胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實驗室中懸浮細胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細胞碎片的情況下）。當在顯微鏡下觀察到懸浮細胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細胞懸液變黃）時，即可進行傳代。

（1）嚴格進行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時可用預實驗的方法選擇適當?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細胞生存，促進細胞生長起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻或預實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應保持用至實驗完成。

（4）消化細胞時應避免消化時間過短導致消化不收集到的細胞數(shù)量少，或消化時間過長導致細胞成團塊樣絮狀游離，這時的細胞已有損傷或死亡，影響細胞數(shù)量和實驗進度。

（5）細胞離心的時候應避免離心力過小收集的細胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細胞產(chǎn)生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后，應先彈散細胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)毎麚p傷小，可以提高細胞活率。

（6）吹打細胞時應盡量避免細胞的產(chǎn)生，以免損傷細胞，影響細胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

WISH(人羊膜細胞) 5×106cells/瓶×2 豚鼠白介素1α(IL1α)ELISA試劑盒 IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標記的羊抗小鼠IgG 0.1ml

FOXD2： 叉頭蛋白D2抗體 人臍靜脈內(nèi)皮細胞(HVVEC)( 5×105 )

人結(jié)直腸腺癌細胞;LoVo 豚鼠白介素18(IL-18)ELISA試劑盒 IgG/Cy3 Cy3標記的羊抗小鼠IgG 0.1ml

FOXE3： 叉頭蛋白E3抗體 轉(zhuǎn)PYTL基因小鼠支持細胞;15P-1 小鼠結(jié)腸平滑肌細胞培養(yǎng)基 100mL

CN5 Others Mouse 小鼠 Coactin 5 / CN5 人細胞裂解液 (陽性對照) 豚鼠白介素17(IL-17)ELISA試劑盒 IgG/PE PE標記的羊抗小鼠IgG 0.1ml

phospho-MCK10 (Tyr513)： 0酸化神經(jīng)上皮酪酸激酶/癌激酶10抗體 盤羊皮膚細胞;ASHS3

IFNA5 Protein Human 重組人 IFNA5 / IFNaG / Ierferon alpha-G 蛋白 (Fc 標簽) 大鼠血管動蛋白(AMOT)ELISA試劑盒 HDL ISA Kit 大鼠高密度脂蛋白 96T

MMS21： E3連接酶MMS21蛋白抗體 AK2 Others Human 人 AK2 / Adenylate kinase 2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

大鼠嗅鞘細胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠血沉(ESR)ELISA試劑盒 Plant Vitamin B12,VB12  植物12 96T

MID2/RNF60/Midline-2： 環(huán)指蛋白60抗體 LS 174T細胞，結(jié)腸腺癌細胞 鼠黑色素瘤細胞系,B16-F1細胞 人侵襲性脈絡膜黑色素瘤細胞;M619

6-10B人鼻咽癌細胞系HEG1： HEG同源蛋白1抗體 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞(傣族);KM9403

LLC-MK2(恒河猴腎細胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H3N2 (A/Hong Kong/1/1968) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 人甘露糖受體(MR)ELISA 試劑盒 E2F2 轉(zhuǎn)錄因子E2F-2抗原 0.5mg

HELZ： 人抑制蛋白抗體 EndoFectagen? 內(nèi)皮細胞轉(zhuǎn)染試劑盒

CCL28 Protein Human 重組人 CCL28 蛋白 (His 標簽) 人甘露糖凝集素受體(MBLR)ELISA 試劑盒 E2F4 轉(zhuǎn)錄因子E2F-4抗原 0.5mg

HEMK1： Hemk甲基轉(zhuǎn)移酶家族1號蛋白抗體 FCGR3B Others Human 人 CD16b / FCGR3B CHO細胞裂解液 (陽性對照)