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目錄:上海一研生物科技有限公司>>細胞系>>小鼠細胞系>> 小鼠結腸黏膜上皮細胞永生化

小鼠結腸黏膜上皮細胞永生化
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參考價1500-3800/件
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更新時間:2024-02-17 17:39:24瀏覽次數:275評價

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供貨周期 現貨 規(guī)格 1×106cells
貨號 E-XB6701 應用領域 生物產業(yè)
主要用途 僅供科研研究實驗 生長特性 貼壁生長
細胞形態(tài) 鋪路石狀細胞,不規(guī)則細胞 組織來源 正常結腸組織
種屬來源 小鼠
小鼠結腸黏膜上皮細胞永生化(公司正在出售的產品:醫(yī)學蛋白分析試劑專題
人血液補體蛋白C3免疫比濁法定量檢測試劑盒
人補體蛋白C3標準溶液
人血液補體蛋白C4免疫比濁法定量檢測試劑盒
人補體蛋白C4標準溶液

傳代培養(yǎng)操作步驟:

一、貼壁培養(yǎng)

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下:

(1)傳代前在倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和生長密度,當細胞生長密度達到80%~90%時,即可進行傳代。

(2)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次,左右輕輕搖晃后棄掉。

(3)根據培養(yǎng)瓶大小向瓶內加入適量含EDTA的,一般應覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。

(4)把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進行消化,2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察,當發(fā)現有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時,再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落,然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化,使用吸頭輕輕吹打,混合均勻,以防消化過度。

(5)吸出所有細胞懸液至離心管內,1000rpm/min離心3~5min。

(6)棄上清,加入適量培養(yǎng)液重懸細胞,輕輕吹打混勻,使細胞均勻分散。

(7)用吸頭吸取適量細胞懸液,以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中,補足培養(yǎng)液,搖勻,放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

(8)根據細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間,甚至進行細胞凍存。


小鼠結腸黏膜上皮細胞永生化


細胞基本屬性:

產品名稱

小鼠結腸黏膜上皮細胞永生化(免疫熒光鑒定)

組織來源

正常結腸組織

種屬

小鼠

生長特性

貼壁生長

細胞代數

10代以內

細胞形態(tài)

鋪路石狀細胞,不規(guī)則細胞

支原體檢測

凍存條件

無血清凍存液,液氮儲存

細胞詳細介紹:

背景簡介;結腸在右髂窩內續(xù)于盲腸,在第3骶椎平面連接直腸。結腸分升結腸、橫結腸、降結腸和乙狀結腸4部,大部分固定于腹后壁,結腸的排列酷似英文字母“M",將小腸包圍在內。結腸橫切面由內到外依次為:粘膜(上皮層,固有層,粘膜肌層),粘膜下層,肌層,外膜。結腸黏膜上皮在環(huán)境或遺傳等多種致癌因素作用下導致結腸癌,是常見的惡性腫瘤之一。因此,體外培養(yǎng)結腸黏膜上皮細胞為研究進一步結腸癌等疾病提供了前提和基礎。該細胞通過慢病毒轉染的方式攜帶SV40基因。

細胞鑒定;細胞角蛋白-18(CK-18)免疫熒光染色為陽性,純度高于90%

細胞規(guī)格;1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測;無

培養(yǎng)基;小鼠結腸黏膜上皮細胞永生化細胞專用培養(yǎng)基(DMEM/F12K+10%FBS+PS)

培養(yǎng)條件;氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃

凍存條件無血清凍存液,液氮儲

發(fā)貨方式復蘇發(fā)貨(免運輸費用)/  凍存發(fā)貨(需加干冰運輸費用) 順豐快遞

供應限制僅限于科學研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用

特別說明以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產品說明書為主



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二、懸浮細胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下:

一般實驗室中懸浮細胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法(培養(yǎng)液中含有細胞碎片的情況下)。當在顯微鏡下觀察到懸浮細胞已經長滿至80%~90%(細胞懸液變黃)時,即可進行傳代。

(1)嚴格進行無菌操作,所用一切試劑及耗材均應無菌,且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上,以免細胞發(fā)生污染。

(2)所用培養(yǎng)液必須適宜細胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細胞,對培養(yǎng)液的要求不一樣,必要時可用預實驗的方法選擇適當的培養(yǎng)液。

(3)胎牛血清對于維持細胞生存,促進細胞生長起著關鍵作用??筛鶕墨I或預實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定,就應保持用至實驗完成。

(4)消化細胞時應避免消化時間過短導致消化不收集到的細胞數量少,或消化時間過長導致細胞成團塊樣絮狀游離,這時的細胞已有損傷或死亡,影響細胞數量和實驗進度。

(5)細胞離心的時候應避免離心力過小收集的細胞數量不夠,或離心力過大對細胞產生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后,應先彈散細胞沉淀,再加入培養(yǎng)液重懸,這樣比直接吹打對細胞損傷小,可以提高細胞活率。

(6)吹打細胞時應盡量避免細胞的產生,以免損傷細胞,影響細胞狀態(tài)(吹打過程中殘留部分液體在吸頭內可以減少氣泡的產生)。

QQ截圖20240105153042.png

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