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低鐵飼料飼喂加定期少量放血建立的缺鐵性貧血大鼠模型

2018-8-10 閱讀(2255)

低鐵飼料飼喂加定期少量放血建立的缺鐵性貧血大鼠模型

(1)復(fù)制方法  ①參考AOAC配方,由低鐵基礎(chǔ)飼料、微量元素混合物及維生素混合物配方組成。在此基礎(chǔ)上,將酪蛋白改為雞蛋清蛋白(每100g新鮮雞蛋清含蛋白質(zhì)1g計算),纖維素改為微晶纖維素。低鐵飼料配方中除玉米淀粉、玉米油、魚肝油、維生素B12外,其余均為分析純。此低鐵飼料配方中經(jīng)測定,其含鐵量每千克飼料約含元素鐵4.8mg。②體重約為65g,經(jīng)測定其Hb含量≥130g/L的4周齡斷乳SD大鼠。隨機(jī)分為對照組(C組)和缺鐵性貧血組(IDA組),兩組大鼠均喂低鐵飼料,自由進(jìn)食,飲去離子水。對照組于造模開始即給予右旋糖酐鐵5mg腹腔注射,以后則以此劑量每周腹腔注射1次。每周記錄1次體重,并經(jīng)尾靜脈采血測Hb。從第3周起,IDA組除飼喂低鐵飼料外,尚輔以尾靜脈放血,2次/周,放血量為每只每次約1~1.5ml(視體重及前1周Hb含量而定,多不超過總血量的10%)。經(jīng)過約8周放血,IDA組大鼠Hb測定值均≤60g/L。此時停止放血,觀察2周,Hb值仍呈繼續(xù)下降趨勢,于第10周頸椎脫臼處死動物,測定血清總蛋白、白蛋白、 Hb含量,并作血清鐵及總鐵結(jié)合力測定等指標(biāo)測定。

(2)模型特點  肉眼觀察當(dāng)大鼠Hb≤100g/L時,模型大鼠耳朵、腳爪均出現(xiàn)明顯蒼白,隨貧血程度加重,大鼠被捉住掙扎時其唇、舌發(fā)紺現(xiàn)象消失。造模早期(約在缺鐵飼料喂養(yǎng)的第3周,Hb值為100g/L左右時),模型大鼠表現(xiàn)為興奮,煩躁不安,喜打架,易咬人等攻擊行為;同等條件下,對照組大鼠則表現(xiàn)為安靜,溫順;隨貧血程度加重,尤其當(dāng)Hb≤60g/L后,模型大鼠則表現(xiàn)為倦怠,活動減少,怕冷,喜蜷縮成團(tuán)。造模過程中,模型大鼠抵抗力下降,易感染,體重增長趨緩。模型大鼠Hb測定值呈持續(xù)性下降,至第10周時 IDA組動物Hb值可降至43g/L。紅細(xì)胞、HCT、MCV、 MCH、MCHC計數(shù)IDR組均較對照組顯著降低。外周血片紅細(xì)胞形態(tài)光鏡下觀察:對照大鼠紅細(xì)胞大小較為一致,血紅蛋白豐滿,紅細(xì)胞中央淡染區(qū)無擴(kuò)大,而模型大鼠紅細(xì)胞大小不等,以小細(xì)胞為主,血紅蛋白減少,紅細(xì)胞中央淡染區(qū)明顯擴(kuò)大,呈小細(xì)胞低色素改變。模型大鼠血清鐵、總鐵結(jié)合力明顯降低,運(yùn)鐵蛋白飽和度及紅細(xì)胞內(nèi)游離原卟啉(FEP)/血紅蛋白(Hb)則明顯增高。

(3)比較醫(yī)學(xué)  迄今為止,缺鐵性貧血動物模型的制備主要采用單純?nèi)辫F飲食、缺鐵飲食輔以定期少量放血或單純放血等方法,后者現(xiàn)已很少應(yīng)用。目前,有關(guān)大鼠缺鐵時間及程度,國內(nèi)外研究結(jié)果報道不一,Hb值32~86g/L、缺鐵時間自3~4周到14周均有報道。本模型采用低鐵飼料輔以定期少量放血的方法,在3~10周內(nèi)成功復(fù)制出大鼠缺鐵性貧血模型,模型動物營養(yǎng)指標(biāo)及缺鐵性貧血指標(biāo)均與以往研究報道相符,有實用價值。



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