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細(xì)胞治療

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細(xì)胞凍存/細(xì)胞分離

細(xì)胞庫(kù)

干細(xì)胞(無(wú)血清)培養(yǎng)基

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BioGems試劑級(jí)重組人胰島素(細(xì)胞培養(yǎng),純度95%)

閱讀:3133發(fā)布時(shí)間:2017-12-18

 

BioGems試劑級(jí)重組人胰島素產(chǎn)品特點(diǎn)

無(wú)血清和低血清培養(yǎng)基的必需添加物;

真核細(xì)胞重組表達(dá),不含動(dòng)物成分 (Animal Free);

生物活性與天然蛋白相同,批間穩(wěn)定;

價(jià)格優(yōu)勢(shì)明顯

 

訂購(gòu)信息

 

品牌

貨號(hào)

產(chǎn)品描述

純度

規(guī)格

價(jià)格

PeproTech/

BioGems

10-365-1g

Recombinant Human Insulin

 重組人胰島素

≥ 95%

1g/支

7000元

 

無(wú)血清培養(yǎng)基中應(yīng)該添加試劑級(jí)別的重組人胰島素,還是藥物級(jí)別的重組人胰島素?

因?yàn)橐葝u素具有治療糖尿病的重要功效,所以多年前就已被制備成藥品,以供糖尿病患

者的使用。

 

藥品確實(shí)具有制備嚴(yán)格(多數(shù)遵循 GMP 標(biāo)準(zhǔn)生產(chǎn)),副作用和安全風(fēng)險(xiǎn)小等優(yōu)點(diǎn),因此

許多無(wú)血清培養(yǎng)基生產(chǎn)廠家傾向于使用藥物級(jí)別的胰島素。然而,仍有不少?gòu)S家在使用試劑

級(jí)別的重組人胰島素來(lái)生產(chǎn)無(wú)血清培養(yǎng)基。

那么,無(wú)血清培養(yǎng)基究竟是該用試劑級(jí)別的重組人胰島素,還是藥物級(jí)別的重組人胰島

素呢?

 

表 3:試劑級(jí)別和藥物級(jí)別重組人胰島素的比較

 

 

試劑級(jí)別重組人胰島素

藥物級(jí)別重組人胰島素

舉例

重組人胰島素

優(yōu)泌林 70/30

諾和靈 30R

英文名  

Recombinant Human Insulin

Humulin 70/30

Novomix30

生產(chǎn)廠家

PeproTech (BioGems)  

禮來(lái)(Lilly)

諾和諾德(Novo Nordisk)

劑型  

凍干粉 (不含任何添加物和賦形劑)

 藥用針劑 (液體)

藥用針劑 (液體)

儲(chǔ)存條件

-20°C

2-8°C

2-8°C

表達(dá)細(xì)胞   

畢赤酵母

大腸桿菌

釀酒酵母

成分

重組人胰島素  

30%重組人胰島素 70%精蛋白鋅重組人胰島素

30%可溶性胰島素 70%低精蛋白鋅胰島素

輔料  

無(wú)

甘油 磷酸氫二鈉 硫酸魚精蛋白 氧化鋅 蒸餾間甲酚(1.6mg/ml) 苯酚(0.65mg/ml)

甘油 磷酸氫二鈉 硫酸魚精蛋白 氯化鋅 間甲酚(1.6mg/ml) 苯酚(0.65mg/ml)

 

藥品與試劑不同,藥品有不同的劑型,如片劑、針劑、膠囊劑和栓劑等十多種。即使對(duì)

于同一種劑型,其中還可分為若干亞型,如針劑包括注射水針劑、注射油針劑、中草藥注射

劑,以及注射用滅菌粉末等。而且藥品通常保存于室溫或 2 - 8°C。這就要求藥品在制備過(guò)

程中除了包含藥物本身(通常稱為主藥)外,還必須加入一些有助于制劑成型(如賦形劑)、穩(wěn)

定(如抑菌劑)、增溶和助溶等具有不同作用的輔料,也就是說(shuō)藥品中含有很多非藥品成分。

將藥品添加入無(wú)血清培養(yǎng)基中進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),不可避免地會(huì)引入諸多不確定的因素,一方

面可能會(huì)對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)或分化產(chǎn)生影響,另一方面可能會(huì)帶來(lái)非預(yù)期的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。而藥物輔

料對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞的作用又很難通過(guò)設(shè)立輔料對(duì)照來(lái)確定,因?yàn)檩o料的成分過(guò)于復(fù)雜,且通常藥

廠并不公開(kāi)輔料的具體組分。

下面我們以藥物級(jí)別的重組人胰島素為例來(lái)看一下輔料對(duì)體外細(xì)胞培養(yǎng)的可能影響。

 

4:藥物級(jí)別重組人胰島素中的輔料

 

輔料  

輔料在胰島素藥物中的功能

輔料對(duì)體外細(xì)胞培養(yǎng)的可能作用

甘油  

穩(wěn)定劑,增溶,調(diào)節(jié)滲透壓和表面張力

對(duì)某些細(xì)胞具有細(xì)胞毒性和影響細(xì)胞 滲透壓的作用[1]

磷酸氫二鈉  

調(diào)節(jié) pH 值

無(wú)

硫酸魚精蛋白  

調(diào)節(jié)胰島素在體內(nèi)的釋放速度(緩釋劑)

對(duì)某些細(xì)胞具有抑制增殖的作用[2]

氧化鋅  

沉淀穩(wěn)定劑,促使重組人胰島素形成六 面體的結(jié)晶型沉淀

對(duì)細(xì)胞具有較強(qiáng)的基因毒性和細(xì)胞毒 性[3]。

間甲酚

抑菌劑(防腐劑)

具有細(xì)胞毒性,可致細(xì)胞凋亡和 DNA 損傷[4]

與白蛋白(albumin)和明膠(gelatin) 不兼容,會(huì)形成沉淀[5]

苯酚

抑菌劑(防腐劑)

 

從上表可以看出,胰島素藥物中的輔料均具有一定的負(fù)面生物學(xué)功能,這些功能在藥物

用于人體內(nèi)治療時(shí)不會(huì)顯現(xiàn),因?yàn)槿梭w具有肝臟等解毒器官,低濃度的有害物質(zhì)短期內(nèi)不會(huì)

對(duì)人體的組織產(chǎn)生影響。但當(dāng)藥物用于體外細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),因?yàn)樗幬镏械妮o料會(huì)直接、*地

作用于細(xì)胞,這些輔料的副作用更容易顯現(xiàn)出來(lái)。雖然當(dāng)藥物加入細(xì)胞培養(yǎng)體系時(shí),輔料的

濃度可能已經(jīng)降得很低,但不排除這些輔料或多或少仍會(huì)對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)或分化產(chǎn)生某些影響。

另外,無(wú)血清培養(yǎng)基體系中所必須添加的組分-白蛋白(albumin)與胰島素藥物中的輔

料-苯酚和間甲酚會(huì)形成沉淀,從而在一定程度上影響白蛋白的功能。其實(shí),已經(jīng)證實(shí)苯酚

的衍生物 - 酚紅(phenol red)有干擾某些細(xì)胞的克隆性生長(zhǎng)的作用,所以用于培養(yǎng)干細(xì)胞或

生長(zhǎng)密度比較低的細(xì)胞的無(wú)血清培養(yǎng)基中通常不添加酚紅,盡管培養(yǎng)基中因此會(huì)缺少酸堿指

示劑。

綜上所述,配制用于體外細(xì)胞培養(yǎng)的無(wú)血清培養(yǎng)基使用不含任何輔料的試劑級(jí)別胰

島素,以避免輔料可能給細(xì)胞帶來(lái)的危害以及實(shí)驗(yàn)結(jié)果不確定性的增加。

 

參考文獻(xiàn)

[1] Armitage WJ and Mazur P. Toxic and osmotic effects of glycerol on human granulocytes. Am J

Physiol. 1984;247(5 Pt 1):C382-9.

[2] Leibovich SJ and Polverini PJ. Protamine sulfate inhibition of serum-induced mitogenic responses:

differential effects on normal and neoplastic cells. J Natl Cancer Inst. 1984;73(6):1337-47.

[3] Osman IF, Baumgartner A, et al. Genotoxicity and cytotoxicity of zinc oxide and titanium dioxide in

HEp-2 cells. Nanomedicine (Lond). 2010;5(8):1193-203.

[4] 王源源等。苯酚致 V79 細(xì)胞毒性及 DNA 損傷效應(yīng)的研究。工業(yè)衛(wèi)生與職業(yè)病,2011;(2):78-81。

[5] Rowe RC, Sheskey PJ, et al. Handbook of Pharmaceutical Excipients (sixth edition).

Pharmaceutical Press. 2009; p485-6.

 

資料來(lái)源:BioGems

 

BioGems無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)添加物—轉(zhuǎn)鐵蛋白和胰島素

 

白蛋白、胰島素和轉(zhuǎn)鐵蛋白等是無(wú)血清培養(yǎng)體系中細(xì)胞生長(zhǎng)所必須的因子。

Biogems的人重組轉(zhuǎn)鐵蛋白和胰島素生物活性與天然蛋白相同,批間穩(wěn)定。這些蛋白由真核細(xì)胞重組表達(dá),不含動(dòng)物成分。質(zhì)控嚴(yán)格,zui大程度地降低了污染的風(fēng)險(xiǎn)。

 

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產(chǎn)品描述

純度

規(guī)格

價(jià)格

PeproTech/

BioGems

10-366-1g

Recombinant Human Transferrin

重組人轉(zhuǎn)鐵蛋白

≥ 95%

1g/支

4900元

PeproTech/

BioGems

10-365-1g

Recombinant Human Insulin

 重組人胰島素

≥ 95%

1g/支

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