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BioGems重組人胰島素和轉(zhuǎn)鐵蛋白—細(xì)胞無血清培養(yǎng)添加
閱讀:2927發(fā)布時(shí)間:2017-12-18
BioGems無血清細(xì)胞培養(yǎng)添加物—轉(zhuǎn)鐵蛋白和胰島素
白蛋白、胰島素和轉(zhuǎn)鐵蛋白等是無血清培養(yǎng)體系中細(xì)胞生長所必須的因子。
Biogems的人重組轉(zhuǎn)鐵蛋白和胰島素生物活性與天然蛋白相同,批間穩(wěn)定。這些蛋白由真核細(xì)胞重組表達(dá),不含動(dòng)物成分。質(zhì)控嚴(yán)格,zui大程度地降低了污染的風(fēng)險(xiǎn)。
訂購信息
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選購背景
一 胰島素和轉(zhuǎn)鐵蛋白在無血清培養(yǎng)中的作用
二 重組和提取的胰島素和轉(zhuǎn)鐵蛋白的區(qū)別
三 胰島素和轉(zhuǎn)鐵蛋白在無血清培養(yǎng)基中的使用濃度
一 胰島素和轉(zhuǎn)鐵蛋白在無血清培養(yǎng)中的作用
胰島素在無血清培養(yǎng)基中的作用
無血清或低血清培養(yǎng)基中,胰島素為必加組分,這是由胰島素對細(xì)胞的重要作用決定的。
我們都知道,胰島素在體內(nèi)zui主要的功能是調(diào)節(jié)機(jī)體血糖水平。其實(shí)胰島素的作用非常
廣泛,包括調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)和脂肪的代謝,以及促進(jìn)細(xì)胞生長等。
轉(zhuǎn)鐵蛋白在無血清培養(yǎng)基中的作用
轉(zhuǎn)鐵蛋白是通用的鐵轉(zhuǎn)運(yùn)劑,其可通過幫助細(xì)胞調(diào)節(jié)對鐵的攝取量而維持細(xì)胞的穩(wěn)態(tài),
進(jìn)而有利于細(xì)胞的生長和增殖。
牛血清中含有牛種屬的轉(zhuǎn)鐵蛋白,由于轉(zhuǎn)鐵蛋白的保守性,牛轉(zhuǎn)鐵蛋白可對人和動(dòng)物
細(xì)胞起到很好地保護(hù)和支持作用,因此培養(yǎng)基中通常要加入牛血清從而組成*培養(yǎng)基。無
血清培養(yǎng)基為達(dá)到與含血清培養(yǎng)基相同或相似的細(xì)胞培養(yǎng)性能,其中也必須添加轉(zhuǎn)鐵蛋白,
以實(shí)現(xiàn)對細(xì)胞鐵離子平衡的調(diào)節(jié),以及對細(xì)胞生長和增殖的維持。
二 無血清培養(yǎng)基中應(yīng)該添加提取的胰島素和轉(zhuǎn)鐵蛋白,還是重組的胰島素和轉(zhuǎn)鐵蛋白?
人胰島素的來源有限,無法滿足臨床和科研的需求,因此人們通常從?;蜇i的胰臟中提取獲得胰島素。
人血漿中轉(zhuǎn)鐵蛋白的含量豐富,約為 25mg/ml,占血漿總蛋白的 4%,而且轉(zhuǎn)鐵蛋白的種屬間交叉活性比較強(qiáng),所以轉(zhuǎn)鐵蛋白多從人或牛的血漿中提取而得。
胰島素種屬間高度保守,豬和牛的胰島素與人的胰島素氨基酸序列上分別僅有 1 個(gè)和 3
個(gè)氨基酸的差異,所以豬和牛的胰島素*可以替代人的胰島素來進(jìn)行科學(xué)實(shí)驗(yàn)和臨床治療。然而,畢竟豬和牛的胰島素屬異種蛋白,進(jìn)入人體后容易產(chǎn)生抗體,影響治療效果,并引起副反應(yīng)。所以,目前臨床上廣泛應(yīng)用的是重組人胰島素,即使用基因工程手段,將人的胰島素基因轉(zhuǎn)移到細(xì)菌或者酵母細(xì)胞中,然后利用發(fā)酵工藝,進(jìn)行大規(guī)模的生產(chǎn),從而得到大量、高純度的人胰島素。
同樣的,提取的轉(zhuǎn)鐵蛋白具有安全性差和批間差大等缺陷。尤其是將提取的轉(zhuǎn)鐵蛋白添加于用于細(xì)胞治療的無血清培養(yǎng)基中時(shí),可能會(huì)將人或動(dòng)物的病原體(如瘋牛病病毒,克雅氏病毒和其它未知病原體)藉回輸人體的細(xì)胞而帶入人體,從而發(fā)生非預(yù)期的疾病。而重組的轉(zhuǎn)鐵蛋白,則可*避免人或動(dòng)物病原體污染的可能性,因此更適合用于配制細(xì)胞治療用的無血清培養(yǎng)基。
三 胰島素和轉(zhuǎn)鐵蛋白在無血清培養(yǎng)基中的使用濃度
胰島素
所培養(yǎng)的細(xì)胞不同,無血清培養(yǎng)基中所需的胰島素量也有所區(qū)別,一般在 1-10mg/L之間。
轉(zhuǎn)鐵蛋白在無血清培養(yǎng)基中的使用濃度
轉(zhuǎn)鐵蛋白
同樣的,細(xì)胞種類不同,對轉(zhuǎn)鐵蛋白的需求量也不同,下表謹(jǐn)供參考。具體的濃度還是要根據(jù)細(xì)胞的種類、狀態(tài)和想要實(shí)現(xiàn)的功能來通過實(shí)驗(yàn)確定。
表 4:轉(zhuǎn)鐵蛋白在無血清細(xì)胞培養(yǎng)基中的添加濃度
| 原代細(xì)胞 | CHO(中國倉鼠卵巢細(xì)胞) | 雜交瘤和 Vero 細(xì)胞 |
轉(zhuǎn)鐵蛋白工作濃度 | 5 -100mg/L | 10 - 50mg/L | 5mg - 20mg/L |
資料來源:BioGems
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