液態(tài)活檢是指通過取樣腦脊液、唾液、胸水、血液、腹水、尿液等對疾病進(jìn)行診斷，能在一定程度上避免組織異質(zhì)性對腫瘤分子分型的影響。目前，基于血液的液態(tài)活檢是最主要的研究方向，主要檢測血液中游離的循環(huán)腫瘤 DNA（ctDNA）、循環(huán)腫瘤細(xì)胞（CTC）、外泌體（Exosome）和微小核糖核酸（miRNA）。

技術(shù)前景：

隨著靶向藥物與免疫治療成為癌癥治療領(lǐng)域的受捧對象，液體活檢這一檢測技術(shù)備受關(guān)注。與傳統(tǒng)的組織活檢相比，液體活檢以微創(chuàng)和可重復(fù)的方式檢測和表征腫瘤的能力可能具有相當(dāng)大的臨床意義，而且在開發(fā)能夠做到這一點的設(shè)備方面已經(jīng)取得了巨大進(jìn)展。

技術(shù)分類：

ctDNA/cfDNA

帶有腫瘤組織基因突變信息的 ctDNA 由腫瘤細(xì)胞釋放到血液中，它被包含在游離DNA（cf-DNA）當(dāng)中，是腫瘤患者cf-DNA中的一部分。近年來ctDNA的研究取得了較大進(jìn)展，ctDNA檢測能夠檢測到包含點突變（SNV）、短片段插入缺失（Indel）、融合基因（Fusion）、拷貝數(shù)變異（CNV）等各類基因突變信息。

CTC

CTC是存在于外周血中的各類腫瘤細(xì)胞的統(tǒng)稱。隨著實體腫瘤的生長，在病灶周圍微環(huán)境發(fā)生特定變化時，將促使一部分腫瘤細(xì)胞獲得異常的活動能力，這些細(xì)胞從原發(fā)腫瘤上脫落，搭乘血液系統(tǒng)或淋巴系統(tǒng)去往身體各處，通常包含更多的信息，更完整的轉(zhuǎn)錄組、蛋白表達(dá)等，可以為臨床提供有用的信息。

外泌體

腫瘤來源的外泌體參與到腫瘤細(xì)胞與基底細(xì)胞的遺傳信息的交換，從而導(dǎo)致大量新生血管的生成，促進(jìn)了腫瘤的生長與侵襲，檢測血液中的外泌體有助于了解更多腫瘤相關(guān)的信息。

microRNA

microRNA作為新型診斷標(biāo)志物近年來被廣泛研究，它可作為腫瘤發(fā)生的早期指標(biāo)。具有多種重要調(diào)節(jié)作用，可通過與靶基因結(jié)合方式調(diào)節(jié)基因表達(dá)，在癌癥的化療耐受、腫瘤的轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)等過程中扮演重要角色。

技術(shù)優(yōu)勢：

1.與人體腫瘤負(fù)荷高度相關(guān)、針對性強(qiáng)；

液體活檢標(biāo)志物的半衰期很短，時效性較強(qiáng)。有研究表明 ctDNA 的半衰期僅不足 2 小時，這使得其可以精確反映腫瘤實時信息。

2.標(biāo)本獲取容易；

組織活檢通常需要外科手段進(jìn)行組織的獲取，在獲取組織的同時，可能存在出血、疼痛、感染、腫瘤播散等風(fēng)險。相比于傳統(tǒng)組織活檢，液體活檢最顯而易見的優(yōu)勢就是無創(chuàng)易獲取，對位置要求低，可操作性強(qiáng)，痛苦小，患者接受度更高。

3.檢測周期短、連續(xù)性好；

液體活檢由于其靈活無創(chuàng)的特點，可重復(fù)性強(qiáng)，故可以實現(xiàn)對于復(fù)發(fā)、療效或耐藥的動態(tài)監(jiān)測。影像學(xué)的提示往往會滯后，并且僅能顯示腫瘤形態(tài)的變化，對于腫瘤內(nèi)部如不同亞克隆間的消長無法分析，而且頻繁的檢測也有輻射帶來的危害。

4.覆蓋病種多，能監(jiān)測多種癌癥；

液體活檢取自循環(huán) DNA 分子，理論上更全面，異質(zhì)性偏差更低。如果結(jié)合組織活檢和液體活檢，則可進(jìn)一步提高陽性率，使更多患者獲益。

常用實驗技術(shù)：

液體活檢技術(shù)主要包括數(shù)字 PCR（dPCR）、實時定量 PCR（qPCR）和二代測序（NGS）三種。其中，dPCR 通常用于單位點檢測；qPCR 用于單基因多位點檢測；NGS 則可同時檢測大量基因的不同突變類型。

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