產(chǎn)品名稱：Miniseq High Output Reagent Kit（300-cycles）基因測序試劑盒

產(chǎn)品貨號：FC-420-1003

產(chǎn)品規(guī)格：

大輸出                         7.5 Gb（MiniSeq High Output Reagent Kit (300-cycles)）

每次運(yùn)行的大讀數(shù)        高達(dá)2500萬

試劑類型                         簇生成，配對末端測序，合成測序

核酸類型                         DNA，RNA

系統(tǒng)兼容性                      MiniSeq

技術(shù)                                測序

產(chǎn)品介紹：

-illumina測序原理步驟:一、sample prep(樣本準(zhǔn)備):基因文庫制備(一個基因組切斷再加接頭)二、cluster generaton(簇的形成):文庫在測序芯片(流動池flowcell)上不斷擴(kuò)增，形成橋式PCR，再切掉反向鏈(reverse strand)，形成許多簇相同的正向序列(正向鏈forward strand)。Snipaste_2019-02-08_21-42-31.png image.png

三、sequencing(測序):熒光信號、可逆阻斷終止技術(shù)、Sequences-by-Synthesis

四、data analysis(數(shù)據(jù)分析)具體內(nèi)容:

一、基因文庫:

image.png 接頭不僅含有與測序芯片上互補(bǔ)的序列，有時還有index序列，由于測序芯片的強(qiáng)大，一個芯片可以同時測許多樣本(動物、植物、微生物)，那如何區(qū)分測序數(shù)據(jù)來自哪個樣本呢?加標(biāo)簽即加index序列，從而來區(qū)分不同的樣本。

二、橋式PCR:文庫種到測序芯片，并進(jìn)行擴(kuò)增的過程。

測序芯片:

Snipaste_2019-02-06_11-40-11.png

圖片發(fā)自簡書App 形成簇之后，加入帶不同熒光標(biāo)記的dNTP(含有疊氮基團(tuán))和聚合酶，使得帶熒光標(biāo)記的dNTP結(jié)合到測序鏈上，再進(jìn)行激光掃描，得到熒光，推出結(jié)果。堿基結(jié)合到測序鏈并發(fā)出熒光信號的過程被稱為Sequences-by-Synthesis。

image.png

image.png 由于疊氮基團(tuán)的存在(可逆阻斷終止技術(shù))，一個循環(huán)只能延長一個堿基，即一個堿基結(jié)合到測序鏈上為一個循環(huán)，當(dāng)結(jié)合上一個堿基后，把其他dNTP和酶用水沖掉，然后進(jìn)行激光掃描，根據(jù)激光掃描顏色判斷是哪個堿基，根據(jù)互補(bǔ)原則反推出結(jié)果，再切掉疊氮基團(tuán)，進(jìn)入新的循環(huán)，加入新的dNTP和酶，再延長堿基，沖掉dNTP和酶，再激光掃描。讀取index(Barcode): 和讀取測序鏈一樣的原理，讀取的目的是為了確定樣本的來源。

產(chǎn)品名稱：illumina MiniSeq病毒基因測序試劑盒        產(chǎn)品貨號：FC-420-1003

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品牌       產(chǎn)品貨號     產(chǎn)品名稱

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illumina MS-102-2002 MiSeq Reagent Kit v2（300 cycles）基因測序試劑盒

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產(chǎn)品名稱：Miniseq High Output Reagent Kit（300-cycles）基因測序試劑盒

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基因測序是一種新型基因檢測技術(shù)，能夠從血液或唾液中分析測定基因全序列，預(yù)測罹患多種疾病的可能性，個體的行為特征及行為合理?；驕y序技術(shù)能鎖定個人病變基因，提前預(yù)防和治療。

基因測序相關(guān)產(chǎn)品和技術(shù)已由實(shí)驗室研究演變到臨床使用，可以說基因測序技術(shù)，是下一個改變世界的技術(shù) 。

基因測序只是基因檢測的方法之一，其又叫基因譜測序，是上*的一種基因檢測標(biāo)準(zhǔn)。

基因測序廣為人知的還有針對唐氏綜合征篩查的無創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測。只需要采集孕婦的外周血，通過對血液中游離DNA(包括胎兒游離DNA)進(jìn)行測序，并將測序結(jié)果進(jìn)行生物學(xué)分析，從而得出胎兒是否患有染色體數(shù)目異常的疾病，包括常見的21-三體綜合征(唐氏綜合征)、18-三體綜合征(愛德華氏綜合征)和13-三體綜合征(Patau綜合征)。

cDNA文庫顯然比基因組DNA文庫小得多，能夠比較容易從中篩選克隆得到細(xì)胞特異表達(dá)的基因。但對真核細(xì)胞來說，從基因組DNA文庫獲得的基因與從cDNA文庫獲得的不同，基因組DNA文庫所含的是帶有內(nèi)含子和外顯子的基因組基因，而從cDNA文庫中獲得的是已經(jīng)過剪接、去除了內(nèi)含子的cDNA。

真核生物基因組DNA十分龐大,其復(fù)雜程度是蛋白質(zhì)和mRNA的100倍左右,而且含有大量的重復(fù)序列. 采用電泳分離和雜交的方法,都難以直接分離到目的基因.這是從染色體DNA為出發(fā)材料直接克隆目的基因的一個主要困難。

高等生物一般具有10^5種左右不同的基因,但在一定時間階段的單個細(xì)胞或個體中,都僅有15%左右的基因得以表達(dá),產(chǎn)生約15000種不同的mRNA分子.可見,由mRNA出發(fā)的cDNA克隆,其復(fù)雜程度要比直接從基因組克隆簡單得多。

cDNA文庫在研究具體某類特定細(xì)胞中基因組的表達(dá)狀態(tài)及表達(dá)基因的功能鑒定方便具有特殊的優(yōu)勢，從而使它在個體發(fā)育、細(xì)胞分化、細(xì)胞周期調(diào)控、細(xì)胞衰老和死亡調(diào)控等生命現(xiàn)象的研究中具有更為廣泛的應(yīng)用價值，是研究工作中zui常使用到的基因文庫。

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