紅榮微再 RNA提取試劑盒(配套762165) *   貨號(hào)：RF-E-19008-S

產(chǎn)品規(guī)格：96 rxn

產(chǎn)品用途：RNA提取

試劑盒類型：磁珠法

提取RNA類型：總RNA

產(chǎn)品介紹：

紅榮微再Inspire Spark©血液RNA提取試劑盒為 PAXgene 管保存的血液樣本中 RNA的提取提供了一個(gè)簡(jiǎn)單快速的解決 方案。本試劑盒采用超順磁性的磁性粒子分離 技術(shù)提取 RNA，所需樣本量少，RNA得率高， 得到的RNA可直接用于RT-PCR、熒光 定量、二代測(cè)序、 病毒 RNA 檢測(cè)以及高通量測(cè)序 等下游實(shí)驗(yàn)。該試劑盒也可高效的 與液體工作站和磁棒法磁珠自動(dòng)提取系統(tǒng)配套使用，以進(jìn)行快速、大樣本量的提取。

儲(chǔ)存運(yùn)輸：

運(yùn)輸條件：DNase Ⅰ和 DNase 稀釋液用干冰運(yùn)輸，其它組分常溫運(yùn)輸不超過(guò) 10 天。

儲(chǔ)存條件：蛋白酶 K、DNase Ⅰ和 DNase 稀釋液保存于-20 ℃；磁珠懸液保存于 2-8℃；   其它組分室溫保存

產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)：

1. 起始樣本量少，僅需1.8mL血液即可完成提取過(guò)程。

2.RNA得率高，得率超過(guò)進(jìn)口金標(biāo)準(zhǔn)試劑。

3.RNA質(zhì)量好，提取到的RNA可直接用于 RT-PCR、  熒光定量、二代測(cè)序、 病毒 RNA檢測(cè)以及高通量測(cè)序等下游實(shí)驗(yàn)。

4.提取通量高，可高效的與液體工作站和磁棒法磁珠自動(dòng)提取系統(tǒng)配套使用，以進(jìn)行快速、大樣本量的提取。

額外設(shè)備試劑需求：

1) 磁力架   2) 無(wú)水乙醇   3) 異丙醇   4) 無(wú)核酸酶水或 0.1% DEPC水   5) 旋轉(zhuǎn)混勻儀   6) 離心機(jī)

產(chǎn)品組分：

紅榮微再 RNA提取試劑盒(配套762165) *   貨號(hào)：RF-E-19008-S

競(jìng)品對(duì)比：

試劑配制： DNase Ⅰ Mix 配制：將10 μL DNase Ⅰ與15 μL DNase稀釋液充分混合，并加入125 μL 無(wú)核 酸酶水或 0.1% DEPC水混勻，每個(gè)反應(yīng)管中加入150 μL混合液，該溶液需現(xiàn)配現(xiàn)用。  洗滌液 WB 配制：緩沖液 WB1和緩沖液 WB2中分別按試劑瓶標(biāo)簽加入一定量的無(wú)水乙醇 ，并做好標(biāo)記。

操作步驟 ：

1、充分混勻后，取1.8 mL PAXgene血置于離心機(jī)中，室溫、4500 rpm、10 min，棄掉廢   液（將離心管傾斜倒置，使液體沿離心管側(cè)壁流出，用吸水紙吸凈管壁內(nèi)殘留液體）。

2、向離心管中加入4 mL無(wú)核酸酶水或0.1% DEPC水，充分渦旋，重懸沉淀，置于離心機(jī)  中，室溫、4500 rpm、10 min。棄掉廢液（將離心管傾斜倒置，使得液體沿離心管側(cè)壁   流出，并用吸水紙吸凈管壁內(nèi)殘留液體）。

3、向離心管中加入350 μL溶解液PDB，充分渦旋，溶解沉淀，加入40μL蛋白酶K和 400 μL裂解液 PLB，渦旋混勻后，將液體轉(zhuǎn)移至1.5 mL離心管中。

4、將離心管置于恒溫震蕩混勻儀上，56℃、1500 rpm、10 min 后，冷卻至室溫。

5、加入400 μL異丙醇，混勻后加入20 μL磁珠，用移液槍吹打混勻磁珠，靜置5 min后將離 心管轉(zhuǎn)移至磁力架上靜置2 min，顛倒混勻，待磁珠*吸附，小心吸棄上清，避免吸棄 磁珠。

6、向離心管中加入400 μL緩沖液WB1，渦旋20s重懸磁珠，轉(zhuǎn)移至磁力架上靜置2 min，  待磁珠*吸附，小心吸棄上清，避免吸棄磁珠，室溫晾干磁珠3min。

7、向離心管中加入150 μLDNase Ⅰ Mix，置于恒溫震蕩混勻儀上，37℃、700 rpm、15 min，消化去除 DNA。  

8、向離心管中加入650 μL緩沖液 WB1，渦旋20s重懸磁珠，置于旋轉(zhuǎn)混勻儀上混勻5 min。轉(zhuǎn)移至磁力架上靜置 2 min，待磁珠*吸附，小心吸棄上清，避免吸棄磁珠。

9、向離心管中加入500 μL緩沖液 WB2，渦旋20s重懸磁珠，轉(zhuǎn)移至磁力架上靜置2 min， 待磁珠*吸附，小心吸棄上清，避免吸棄磁珠。

10、向離心管中加入500 μL無(wú)水乙醇，渦旋20s重懸磁珠，轉(zhuǎn)移至磁力架上靜置2 min，待 磁珠*吸附，小心吸棄上清，避免吸棄磁珠。

11、短暫離心，收集管壁上的液滴，轉(zhuǎn)移至磁力架上，吸棄管底部的液體，空氣中晾干5-10 min至磁珠干燥。

12、加入30~50 μL洗脫液 RFW 至離心管中，充分混勻磁珠，室溫靜止3 min，轉(zhuǎn)移至磁力架上靜置2 min，待磁珠*吸附，轉(zhuǎn)移上清至新的離心管中，保存于-20℃?zhèn)溆谩?/span>

注意事項(xiàng)：

) 蛋白酶 K 溶液勿長(zhǎng)時(shí)間室溫放置，以免影響其活性。

2) 磁珠懸液使用前需渦旋混勻。

3) 由于冰凍、離心可能會(huì)對(duì)磁珠的性質(zhì)、性能造成嚴(yán)重的損害，因此請(qǐng)勿對(duì)磁珠懸液進(jìn)   行冰凍和離心操作。

4) RNA 容易降解，在樣品前處理的過(guò)程中，盡可能加快樣本處理速度。

5) PAXgene 管采集血液后放置于常溫（18-25℃）至少 2 小時(shí)才能進(jìn)行 RNA 提取。