上海橋星貿(mào)易有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品: 進(jìn)口透析袋,密理博ECL發(fā)光液,B27無(wú)血清培養(yǎng)基,Gibco膠原酶 |
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參考價(jià) | ¥ 320 |
訂貨量 | 1 |
更新時(shí)間:2024-01-07 16:07:32瀏覽次數(shù):2097
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PI染色液使用說(shuō)明
貨號(hào):FXC0670
規(guī)格:50ml
PI染色液產(chǎn)品簡(jiǎn)介
碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)即2,7-二氨基-9-苯基10-二乙胺基丙基碘化菲啶,是一種核酸熒光染料,它不能透過(guò)完整的細(xì)胞膜,但能夠透過(guò)死細(xì)胞和凋亡中晚期細(xì)胞的細(xì)胞膜而使細(xì)胞核紅染。因此,作為熒光探針常用于細(xì)胞凋亡(apoptosis)或細(xì)胞壞死(necrosis)的檢測(cè)。在流式細(xì)胞和激光共聚焦分析中,常用于凋亡早晚期的細(xì)胞以及死細(xì)胞的區(qū)分以及在免疫染色時(shí)用于死細(xì)胞的非特異性染色的減除。由于PI可以定量插入DNA中,因此,還可用于細(xì)胞周期的分析與測(cè)定研究。
PI-DNA復(fù)合物的激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)分別為535 nm和615 nm。
本染色液將濃縮的染液與稀釋液分開(kāi)放置,一方便為了染液的穩(wěn)定性,另一方便為了快速解凍(稀釋液放2-8℃)
試劑組成 | 規(guī)格 | 保存條件 |
PI濃縮液(50X) | 1ml | -20℃避光 |
PI稀釋液50ml | 50ml | 2-8℃ |
本染色液整體有效期一年,稀釋液長(zhǎng)久不用可放-20度。
PI染色液使用說(shuō)明:
染色液的配制:將PI濃縮液取出解凍,輕輕混勻,短時(shí)間離心,根據(jù)使用量,按照1ml PI稀釋液加入20ul PI濃縮液的比例配制,即成。此配好的染色液濃度度為10ug/ml,如果感覺(jué)染色顏色比較深,可適當(dāng)?shù)南♂專(zhuān)ㄓ孟♂屢海?。此配好的染色液未用完可存放?20℃避光。
a.對(duì)于細(xì)胞或組織樣品,固定后,適當(dāng)洗滌去除固定劑。隨后如果需要進(jìn)行免疫熒光染色,則先進(jìn)行免疫熒光染色,染色完畢后再按后續(xù)步驟進(jìn)行PI染色。如果不需要進(jìn)行其它染色,則直接進(jìn)行后續(xù)的PI染色。
b. 對(duì)于貼壁細(xì)胞或組織切片,加入少量,覆蓋住樣品即可。對(duì)于懸浮細(xì)胞,至少加入待染色樣品體積3倍的染色液,混勻。室溫放置3-5分鐘。
c. 吸除,用TBST、PBS或生理鹽水洗滌2-3次,每次3-5分鐘。
d.直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí),會(huì)看到凋亡細(xì)胞的細(xì)胞核呈致密濃染,或呈碎塊狀致密濃染。
注意事項(xiàng):
1. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
2. 此染色液可一次性配完使用,保存于-20℃。但相對(duì)來(lái)說(shuō),50ml液體解凍速度不如1ml的解凍快,而且染料在高濃度時(shí)更穩(wěn)定。
3. 本產(chǎn)品配送的滴瓶一滴約為50ul。裝入染色液后請(qǐng)?zhí)兹牒谏饪诖?/p>
4. 染色時(shí)間可根據(jù)染色結(jié)果來(lái)適當(dāng)調(diào)整。