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超氧陰離子清除能力試劑盒說明書

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規(guī)格:100T/96S
產(chǎn)品內(nèi)容:
提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:液體1mL×1支,4℃避光保存。
試劑二:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加4mL蒸餾水充分溶解。
試劑三:液體5mL×1瓶,4℃保存。
試劑四:液體5mL×1瓶,4℃避光保存。
試劑五:液體5mL×1瓶,4℃避光保存。
產(chǎn)品說明:
超氧陰離子自由基作為生物體代謝過程中產(chǎn)生的一種自由基,可攻擊生物大分子,如脂質(zhì)、蛋
白質(zhì)、核酸和聚不飽和脂肪酸等,使其交鏈或者斷裂,引起細胞結(jié)構(gòu)和功能的破壞,與機體衰老和
病變有很密切的關(guān)系,清除超氧陰離子自由基的研究已經(jīng)得到了廣泛的關(guān)注。
AP-TEMED系統(tǒng)產(chǎn)生超氧陰離子,與鹽酸羥胺反應(yīng)生成NO2-,NO2-與對氨基苯磺酸和α-萘
胺的作用生成紅色的偶氮化合物,在530nm處有特征吸收峰,樣品對超氧陰離子的清除能力與530nm
的吸光值呈負相關(guān)。
天平、研缽、低溫離心機、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。
操作步驟:
一、樣品處理
1. 組織:按照質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g,加入1mL提取液)
加入提取液,冰浴勻漿后于4℃,10000g離心10min,取上清置于冰上待測。
2. 細胞:按照細胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入
1mL提取液),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后4℃,
10000g離心10min,取上清置于冰上待測。
3. 培養(yǎng)液或其它液體:直接檢測。
4. 粉劑藥物可配制成相同濃度,比如1mg/mL。
注意事項:
1. 試劑一4℃可保存2 個月,配制好的試劑二4℃可保存一周,建議實驗前配制,并盡快使用。
2. 樣品處理完后立即進行測定,或者低溫保存不超過24 小時

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