一、產(chǎn)品概述

G418溶液，也被稱為Geneticin，是一種氨基糖苷類抗生素。其結(jié)構(gòu)類似于慶大-霉素B1和新-霉素，但具有獨-特的生物活性。該溶液的濃度通常為50mg/ml，是一種即用型抗生素，無需進一步處理即可直接用于細胞培養(yǎng)。

二、來源與生成

G418來源于Micromonospora rhodorangea（紅橙小單孢菌），是一種通過發(fā)酵等生物技術(shù)手段制得的抗生素。其生產(chǎn)過程嚴格遵循GMP（良好生產(chǎn)規(guī)范）等質(zhì)量標準，以確保產(chǎn)品的純度和安全性。

三、作用機制

G418通過與原核和真核細胞中的核糖體結(jié)合，抑制蛋白質(zhì)的合成。具體來說，它能夠與70S和80S核糖體結(jié)合，阻斷肽鏈的延伸，從而干擾蛋白質(zhì)的正常合成過程。這種抑制作用對多種細胞類型都有效，包括細菌、酵母、原生動物、蠕蟲、高等植物和哺乳動物細胞。

四、應(yīng)用與用途

細胞篩選：G418是最-常用的細胞穩(wěn)定轉(zhuǎn)染抗性篩選試劑。在基因工程中，當neo基因被整合進真核細胞DNA后，能夠啟動neo基因編碼的序列轉(zhuǎn)錄為mRNA，從而獲得抗性產(chǎn)物氨基糖苷磷酸轉(zhuǎn)移酶的高效表達。這使得細胞能夠在含有G418的選擇性培養(yǎng)基中生長，從而篩選出表達特定抗性基因的穩(wěn)定細胞株。

細胞維持：除了篩選外，G418還用于穩(wěn)定細胞株的維持。通過持續(xù)添加G418到細胞培養(yǎng)基中，可以抑制未轉(zhuǎn)染或未獲得抗性的細胞生長，從而維持已轉(zhuǎn)染并表達抗性基因的細胞株。

五、使用注意事項

無菌操作：G418溶液為無菌溶液，使用過程中應(yīng)避免污染。建議在無菌條件下進行細胞培養(yǎng)和篩選操作。

濃度選擇：用于細菌時，G418的濃度范圍通常為100200µg/mL；用于大多數(shù)哺乳動物細胞時，濃度范圍為200500µg/mL。具體濃度應(yīng)根據(jù)實驗需求和細胞類型進行調(diào)整。

保存條件：本產(chǎn)品應(yīng)保存在-20°C的低溫環(huán)境中，以延長其有效期。反復(fù)凍融易導(dǎo)致抗生素失效，因此建議適當分裝后再使用。

僅供科研實驗用，不做其他用途！