壓縮空氣微生物檢測

目的：通過壓縮空氣檢測微生物狀況，確認(rèn)壓縮空氣質(zhì)量，保證無菌過濾產(chǎn)品沒有被微生物污染。

范圍：適用于無菌過濾用氣點壓縮空氣浮游菌測試。

責(zé)任：參與測試的所有人員對實施本規(guī)程負(fù)責(zé)

QA 質(zhì)量員負(fù)責(zé)具體測試工作；無菌過濾操作人員負(fù)責(zé)對采樣管和采樣頭的清潔和消毒滅菌；

QC 檢驗員負(fù)責(zé)測試培養(yǎng)皿的準(zhǔn)備和采樣后的培養(yǎng)觀察。

測試依據(jù):

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)《醫(yī)藥工業(yè)潔凈室(區(qū))浮游菌測試方法》（GB/T16293-1996）

測試原理

壓縮空氣的微生物測試采用浮游菌測試法。其原理為通過收集懸浮在壓縮空氣中的生物粒子于專門的培養(yǎng)基，經(jīng)若干時間，在適宜的生長條件下讓其繁殖到可見菌落（ CFU）進(jìn)行記數(shù)，從而判定單位壓縮空氣中的活微生物數(shù)，來評判空氣的無菌狀況。

儀器和試劑：JCQ-1 型浮游菌采樣器，ф 90×15mm 培養(yǎng)皿（普通肉湯瓊脂培養(yǎng)基），恒溫培養(yǎng)箱。

器具準(zhǔn)備

1.培養(yǎng)基平皿的制備用ф 90×15mm 培養(yǎng)皿進(jìn)行制備，每皿中加培養(yǎng)基約 20ml。

2.采樣管清洗滅菌 每次采樣結(jié)束，在萬級洗滌間將采樣管用純化水沖洗 3 次，晾干， 然后將采樣管兩頭開口用鋁箔封住，使用前在萬級滅菌間用蒸汽滅菌鍋 132℃滅菌 10 分鐘。

3.采樣儀表面清潔  用消毒劑（0.1%新潔而滅或 75%酒精）對浮游菌采樣儀表面和取樣器外罩等擦拭消毒后置于萬級潔凈區(qū)域。

樣品采集

1.器皿消毒

2.在無菌過濾用氣點用消毒劑（0.1%新潔而滅或 75%酒精）擦拭采樣器的外表面和外罩及壓縮空氣接頭。

3.打開采樣器外罩，用消毒劑消毒采樣器的頂蓋，轉(zhuǎn)盤以及外罩的內(nèi)表面，蓋上采樣器外罩，壓緊壓板使外罩密封。

測試程序

1.抽氣調(diào)流量

2.小心按上取樣管，將采樣管與待測試的壓縮空氣管閥門連接。打開電源，開動真空泵， 真空泵 15 秒后自動抽氣,調(diào)節(jié)壓縮空氣進(jìn)氣閥，控制進(jìn)氣流量 50L/min，設(shè)置采樣時間為 5 分鐘（轉(zhuǎn)盤 5  分鐘轉(zhuǎn)一圈）， 抽走殘留消毒劑，5 分鐘后真空泵自動關(guān)閉。關(guān)閉壓縮空氣空氣進(jìn)氣閥。

3.打開采樣器外罩，將ф 150×15mm 普通肉湯瓊脂培養(yǎng)基置于采樣器內(nèi)，蓋上外罩，壓緊壓板使外罩密封，調(diào)節(jié)刻度盤，旋轉(zhuǎn)調(diào)節(jié)鈕使采樣器狹縫與培養(yǎng)基保持約 2mm 距離。

4.按設(shè)置按鈕，設(shè)置采樣時間為 20 分鐘（轉(zhuǎn)盤 20 分鐘轉(zhuǎn)一圈），按啟動鍵， 真空泵 15 秒后開始抽氣，調(diào)節(jié)壓縮空氣進(jìn)氣閥，進(jìn)氣量控制在 50L/min，對壓縮空氣進(jìn)行采樣。采樣時間到，真空泵自動關(guān)閉。

5.采樣結(jié)束后，關(guān)閉壓縮空氣進(jìn)氣閥，關(guān)閉采樣儀電源，打開外罩，取出培養(yǎng)皿，蓋上皿蓋倒置。用 0.1％新潔而滅或 75%酒精輕輕擦洗外罩的內(nèi)壁和轉(zhuǎn)盤，蓋上外罩。每次測試采樣一次。

樣品的培養(yǎng)

將采集的培養(yǎng)基平皿樣品置于恒溫箱 35℃恒溫培養(yǎng) 48 小時（須安排空白對照）。

菌落記數(shù)

培養(yǎng)結(jié)束后用肉眼直接記數(shù)，然后用 10 倍放大鏡檢查是否有遺漏。若平板上有 2 個或 2個以上的菌落重疊但可分辨時以 2 個或 2 個以上菌落記數(shù)。

結(jié)果判定  

無菌壓縮空氣浮游菌是否合格的判斷標(biāo)準(zhǔn)等同于 100 級潔凈區(qū)的標(biāo)準(zhǔn)。因此無菌壓縮空氣的浮游菌濃度≤5CFU/m3 為合格標(biāo)準(zhǔn)。

若測得的壓縮空氣浮游菌濃度超過合格標(biāo)準(zhǔn),則必須對此空氣系統(tǒng)先消毒，然后重新采樣兩次，兩次測試結(jié)果必須合格才能說明測試結(jié)果合格。

測試結(jié)束填寫《壓縮空氣浮游菌測試報告》。  

采樣周期

無菌過濾點壓縮空氣浮游菌檢測周期為每月測試一次