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抗 DIA 血型檢測(cè)試劑

Diego 血型系統(tǒng)及抗 Dia 試劑簡(jiǎn)介

Diego 血型系統(tǒng)于 1955 年被發(fā)現(xiàn)，并以FIRST產(chǎn)生針對(duì)該血型系統(tǒng)抗原的患者命名?？?/span> Dia 和抗 Dib 與新生兒溶血?。?/span>HDN）的關(guān)聯(lián)性較輸血反應(yīng)更高。由 Diego 抗體引發(fā)的 HDN 在東南亞和南美洲更為常見。抗 Dia 可導(dǎo)致中度至重度 HDN，已有相關(guān)病例報(bào)告。

原理

該試劑在抗球蛋白檢測(cè)階段，會(huì)使攜帶相應(yīng) Dia 抗原的紅細(xì)胞發(fā)生間接凝集現(xiàn)象。通常無凝集表明相應(yīng) Dia 抗原缺失（詳見限制條件）。

試劑

美德聲提供的人抗 Dia 血型試劑由人血清稀釋于含大分子增強(qiáng)劑和牛血清白蛋白的氯化鈉溶液中制備而成。每種試劑均按最佳稀釋比例供應(yīng)，適用于所有推薦檢測(cè)技術(shù)，無需進(jìn)一步稀釋或添加。批號(hào)參考和有效期見瓶簽。

儲(chǔ)存和穩(wěn)定性

試劑瓶到貨后應(yīng)于 2 - 8°C 下儲(chǔ)存。長時(shí)間在此溫度范圍外儲(chǔ)存可能導(dǎo)致試劑活性加速喪失。該試劑已按 BS EN ISO 23640:2015 文件要求，完成 37°C 和 -25°C 下的運(yùn)輸穩(wěn)定性研究。

樣本采集和準(zhǔn)備

血液樣本可采集于含 EDTA、檸檬酸鹽、CPDA 抗凝劑的試管中，或作為凝固樣本。樣本應(yīng)盡快檢測(cè)。若檢測(cè)延遲，需于 2 - 8°C 下儲(chǔ)存。有明顯溶血或微生物污染的樣本不得用于檢測(cè)。顯示裂解跡象的血液樣本可能導(dǎo)致結(jié)果不可靠。檢測(cè)前用 PBS 或等滲鹽水洗滌所有血液樣本更佳，但非必需。

質(zhì)量控制與建議

1. 建議每批檢測(cè)同時(shí)進(jìn)行陽性對(duì)照（最好是雜合子細(xì)胞）和陰性對(duì)照。若對(duì)照結(jié)果不符合預(yù)期，則檢測(cè)結(jié)果無效。

2. 抗球蛋白技術(shù)只有在所有陰性檢測(cè)結(jié)果與 IgG 致敏紅細(xì)胞反應(yīng)呈陽性時(shí)才有效。

3. 試劑中含大分子增強(qiáng)劑，可能與 IgG 致敏細(xì)胞產(chǎn)生假陽性反應(yīng)，建議用患者血漿測(cè)試患者細(xì)胞以檢測(cè)假陽性反應(yīng)。

4. 在管技術(shù)中，使用瓶裝滴管時(shí)，一體積約為 50µl。

5. 試劑的使用和結(jié)果解讀必須由經(jīng)過適當(dāng)培訓(xùn)和資質(zhì)的人員，按照試劑使用國家的要求進(jìn)行。

所需材料

• 抗人球蛋白

• Bio-Rad ID 卡（LISS/Coombs 或抗 IgG）

• Bio-Rad ID 離心機(jī)

• Bio-Rad ID-CellStab

• Bio-Rad ID 孵箱，溫度設(shè)定為 37°C ± 2°C

• 玻璃試管（10 x 75 mm 或 12 x 75 mm）

• IgG 致敏紅細(xì)胞

• Ortho BioVue 系統(tǒng)設(shè)備（AHG 多特異性或抗 IgG）

• Ortho BioVue 系統(tǒng)離心機(jī)

• Ortho BioVue 系統(tǒng)加熱塊，溫度設(shè)定為 37°C ± 2°C

• Ortho 0.8% 紅細(xì)胞稀釋液

• PBS 溶液（pH 6.8–7.2）或等滲鹽水溶液（pH 6.5–7.5）

• 陽性（最好是雜合子）和陰性對(duì)照紅細(xì)胞

• 量筒移液管

• 水浴或干式加熱孵箱，溫度設(shè)定為 37°C ± 2°C

使用說明

 間接抗球蛋白技術(shù)（IAT）

1. 用 PBS 或等滲鹽水制備 2-3% 的紅細(xì)胞懸浮液。

2. 在標(biāo)記好的試管中加入一體積的  試劑和一體積的紅細(xì)胞懸浮液。

3. 充分混合后，在 37°C 下孵育 15 分鐘。

4. 用 PBS 或等滲鹽水洗滌紅細(xì)胞 4 次，注意每次洗滌后傾倒鹽水并重新懸浮紅細(xì)胞。最后一次洗滌后傾倒鹽水。

5. 向每個(gè)干燥的紅細(xì)胞按鈕中加入兩體積的抗人球蛋白或抗 IgG。

6. 充分混合后，將所有試管以 1000 rcf 的相對(duì)離心力或合適的替代時(shí)間和力離心 20 秒。

7. 輕輕重新懸浮紅細(xì)胞按鈕并宏觀觀察凝集情況。

8. 用 IgG 致敏紅細(xì)胞確認(rèn)所有陰性反應(yīng)的有效性。

 Bio-Rad-ID 微量分型技術(shù)

1. 在 ID-Cellstab 或 ID 稀釋液 2 中制備 0.8% 的紅細(xì)胞懸浮液。

2. 從 LISS/Coombs 或抗 IgG ID 卡中取下所需數(shù)量的微量管的鋁箔。

3. 在適當(dāng)?shù)奈⒘抗苤屑尤?/span> 50µl 的 0.8% 紅細(xì)胞懸浮液和 25µl 的試劑。

4. 在 37°C 下孵育 ID 卡 15 分鐘。

5. 在 Bio-Rad ID 離心機(jī)中離心 ID 卡。

6. 宏觀觀察凝集情況。

 Ortho BioVue 分型技術(shù)

1. 在 0.8% Ortho 紅細(xì)胞稀釋液中制備 0.8% 的紅細(xì)胞懸浮液。

2. 從 AHG 多特異性或抗 IgG 設(shè)備中取下所需數(shù)量的反應(yīng)室的鋁箔。

3. 在適當(dāng)?shù)姆磻?yīng)室中加入 50µl 的紅細(xì)胞懸浮液和 40µl 的試劑。

4. 在 37°C 下孵育盒 15 分鐘。

5. 在 Ortho BioVue 系統(tǒng)離心機(jī)中離心盒。

6. 宏觀觀察凝集情況。

結(jié)果解讀

1. 陽性：紅細(xì)胞凝集為陽性結(jié)果，在檢測(cè)程序的可接受限制內(nèi)，表明紅細(xì)胞上存在 Dia 抗原。

2. 陰性：紅細(xì)胞無凝集為陰性結(jié)果，在檢測(cè)程序的可接受限制內(nèi)，表明紅細(xì)胞上不存在 Dia 抗原。

性能特征

1. 試劑已通過推薦技術(shù)中的程序進(jìn)行了表征。

2. 在放行前，每批抗 Dia 試劑均通過推薦技術(shù)對(duì)一系列抗原陽性紅細(xì)胞進(jìn)行測(cè)試，以確保合適的反應(yīng)性。

3. 已排除在隨機(jī)人群中發(fā)病率為 1% 或更高的抗原的污染抗體，這通過使用適當(dāng)?shù)目乖幮约t細(xì)胞進(jìn)行測(cè)試或通過使用之前已吸收去除干擾特異性的試劑進(jìn)行測(cè)試來實(shí)現(xiàn)。

4. 在常規(guī)特異性測(cè)試中可能無法排除針對(duì) Xga、Doa、Yta、Cob、Wra、Bga 和 Vw 的抗體，這取決于是否有合適的測(cè)試細(xì)胞可用。對(duì)于 Ytb、Mg 和 Vw 以及其他低頻抗原，也是如此。

5. 試劑的質(zhì)量控制使用的是在使用前已用 PBS 或等滲鹽水洗滌兩次的紅細(xì)胞。

6. 試劑符合英國血液輸注服務(wù)指南最新版本中的建議。

儲(chǔ)存溫度 2 - 8°C

美德聲根據(jù)客戶需要，推出全線稀有血型檢測(cè)試劑，產(chǎn)地英國：

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我們的用戶

該試劑主要用于血液免疫學(xué)檢測(cè)，血液中心血站參比實(shí)驗(yàn)室。國內(nèi)限于R&D。

美德聲專業(yè)提供如下產(chǎn)品和服務(wù)

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