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北京普天同創(chuàng)生物科技有限公司

水產(chǎn)品孔雀石綠、結(jié)晶紫的速測技術(shù)

時(shí)間:2019-4-23 閱讀:1745
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4.5.1概述

孔雀石綠是一種帶有金屬光澤的綠色結(jié)晶體,又名堿性綠、嚴(yán)基塊綠、孔雀綠。它既是殺真菌劑,又是染料,易溶于水,溶液呈藍(lán)綠色。研究結(jié)果表明,孔雀石綠具有高毒素、高殘留和致癌、致畸、致突變等副作用。鑒于孔雀石綠的危害性,我國將孔雀石綠列入《食品動(dòng)物禁用的獸藥及其化合物清單》。

以往,孔雀石綠殘留量測定采用液相色譜法,操作復(fù)雜,需要專業(yè)實(shí)驗(yàn)人員,儀器工作環(huán)境要求高,不能滿足現(xiàn)場檢測需求。與此相比,孔雀石綠定性快速檢測試劑盒法的檢測步驟較簡單,技術(shù)條件要求低,大大縮短了測定時(shí)間,同時(shí)也降低了檢測成本。

4.5.2水產(chǎn)品孔雀石綠、結(jié)晶紫的速測技術(shù)—速測盒法

1.速測原理

水產(chǎn)品中的孔雀石綠、結(jié)晶紫及其代謝產(chǎn)物無色孔雀石綠、無色結(jié)晶紫經(jīng)過前處理后,樣液經(jīng)過孔雀石綠SPE小柱富集形成有色環(huán)帶,可初步判斷樣品中是否含有有色孔雀石綠、結(jié)晶紫。用洗脫劑將柱上待檢物洗脫下來,經(jīng)柱衍生化后,加萃取劑,若萃取劑有明顯的綠色或紫色說明樣品中含有待檢物質(zhì)。將萃取劑取出滴于白色點(diǎn)滴板上,可在板上形成綠色或紫色環(huán)斑,從而可準(zhǔn)確定性樣品中是否含有孔雀石綠或結(jié)晶紫。

2.速測范圍

本法用于檢測魚類、蝦類等孔雀石綠、結(jié)晶紫、無色孔雀石綠、無色結(jié)晶紫成分,適用于市場監(jiān)督部門、水產(chǎn)監(jiān)督部門對(duì)水產(chǎn)品的現(xiàn)場及化驗(yàn)室檢測監(jiān)控。

本方法使用的試材由北京中衛(wèi)食品科技公司、廣州天河綠洲生化研究中心提供。

3.方法特點(diǎn)

(1)可現(xiàn)場操作,用于快速篩選法。

(2)檢測速度快,檢測一個(gè)樣品30min左右,可多殘留分析。

(3)不需其他試劑,檢測成本低。

(4)不需做對(duì)照實(shí)驗(yàn),特異性高,可準(zhǔn)確定性,檢測下限1.0ug/kg。

4.速測步驟與結(jié)果判定(實(shí)驗(yàn)室快速按照A,現(xiàn)場快速按照B)

(1) A取水產(chǎn)品可食部分用絞肉機(jī)絞碎后,準(zhǔn)確稱取10.0g于100mL離心管中,加入提取劑1、提取劑2各一瓶,振搖5min后,4000rpm離心5min,取上清液10mL于100mL量筒中,用蒸餾水定容至30mL。

B用剪刀剪取約10g樣品于研缽中,加入一瓶提取劑2研碎后,再加入一瓶提取劑1繼續(xù)研磨約3~5min,用濾紙過濾后擠干殘?jiān)?,收集濾液10mL于100mL量筒中,用蒸餾水定容至30mL。

(2)層析柱激活。層析柱在使用前依次加入2mL洗脫劑、5mL蒸餾水,吸耳球上加壓,廢液舍棄。

(3)過層析柱。將50mL注射器與層析柱連接,將步驟(1)中收集到的樣液倒入注射筒里,用注射塞加壓,加快流速,建議30mL樣本通過柱子的時(shí)間為5~8min,待樣液*流干,棄去流出液,然后依次加2mL洗滌劑及2mL蒸餾水于層析柱中,吸耳球上加壓,廢液舍棄。

(4)結(jié)果初判。觀察層析柱中吸附劑顏色變化,若吸附劑逐漸形成綠色環(huán)帶,可初步判斷樣本中含有孔雀石綠;若吸附劑逐漸形成紫色環(huán)帶,可初步判斷樣本中含有結(jié)晶紫;加0.8mL洗脫液于層析柱中,吸耳球上加壓,用離心管1收集流出液,根據(jù)液體顏色來判斷。

(5)衍生化。依次加2mL洗脫液及2mL蒸餾水于層析柱中,吸耳球上加壓,廢液舍棄,將一瓶衍生化試劑倒入層析柱中,加入2mL蒸餾水用吸耳球從上口加壓擠干;棄去流出液,將步驟(4)中離心管1的洗脫液加入柱中,吸耳球上加壓,用離心管2收集流出液,再用0.8mL洗脫液于層析柱中,吸耳球上加壓,用此離心管2收集混勻。

(6)萃取。取步驟(5)中的離心管2,加入0.5mL蒸餾水后,再加入0.5mL萃取劑,扣上管塞混勻靜置,離心管2下層若有明顯的綠色或紫色則可判斷樣品中含有孔雀石綠或結(jié)晶紫,若無明顯的綠色或紫色需進(jìn)一步的判斷。

(7)檢測。用1mL注射器取步驟(6)中離心管2中的下層萃取液(注意不要吸到上層的液體),加到白色點(diǎn)滴板的一個(gè)孔上,樣液漸漸揮干,若在孔上形成綠色斑環(huán)說明樣品中含有孔雀石綠,形成紫色斑環(huán)樣品中含有結(jié)晶紫。

文章來源:《食品安全快速檢測技術(shù)》

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