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國(guó)產(chǎn)醫(yī)用離心機(jī)XZ-6G沉降場(chǎng)流分級(jí)的應(yīng)用順序化可以大大延伸在一次實(shí)驗(yàn)中分子量的分離范圍。實(shí)現(xiàn)順序化有兩個(gè)途徑:逐漸改變離心機(jī)的轉(zhuǎn)速或改變載體的密度。經(jīng)常在水中增加蔗糖的濃度。開(kāi)始時(shí)使用很強(qiáng)的場(chǎng)以分離分子量小的樣品,然后逐步降低轉(zhuǎn)速或*停止旋轉(zhuǎn)來(lái)促使大分子量的樣品從柱槽中淋出,使用這種順序勝利地分離了不同尺寸的聚苯乙烯顆粒膠乳,這相當(dāng)于分子量相差1000倍。速率區(qū)帶離心法是在離心前于離心管內(nèi)先裝入密度梯度介質(zhì)(如蔗糖、甘油、KBr、CsCl等),待分離的樣品鋪在梯度液的頂部、離心管底部或梯度層中間,同梯度液一起離心。離心后在近旋轉(zhuǎn)軸處(X1)的介質(zhì)密度小,離旋轉(zhuǎn)軸遠(yuǎn)處(X2)介質(zhì)的密度大,但大介質(zhì)密度必須小于樣品中粒子的小密度,即ρP>ρm。這種方法是根據(jù)分離的粒子在梯度液中沉降速度的不同,使具有不同沉降速度的粒子處于不同的密度梯度層內(nèi)分成一系列區(qū)帶,達(dá)到彼此分離的目的。梯度液在離心過(guò)程中以及離心完畢后,取樣時(shí)起著支持介質(zhì)和穩(wěn)定劑的作用,避免因機(jī)械振動(dòng)而引起已分層的粒子再混合。
由于ρP>ρm可知S>0,因此該離心法的離心時(shí)間要嚴(yán)格控制,既有足夠的時(shí)間使各種粒子在介質(zhì)梯度中形成區(qū)帶,又要控制在任一粒子達(dá)到沉淀前。如果離心時(shí)間過(guò)長(zhǎng),所有的樣品可全部到達(dá)離心管底部;離心時(shí)間不足,樣品還沒(méi)有分離。由于此法是一種不*的沉降,沉降受物質(zhì)本身大小的影響較大,一般是應(yīng)用在物質(zhì)大小相異而密度相同的情況。常用的梯度液有Ficoll、Percoll及蔗糖。
自動(dòng)平衡醫(yī)用離心機(jī)TDZ4-WS轉(zhuǎn)速與離心力的換算:(離心機(jī)分離因素計(jì)算公式)分離因素的含義:
在同一萃取體系內(nèi)兩種溶質(zhì)在同樣條件下分配系數(shù)的比值。 分離因素愈大(或愈小),說(shuō)明兩種溶質(zhì)分離效果愈好,分離因素等于1,這兩種溶質(zhì)就分不開(kāi)了。離心機(jī)上的分離因素則指的是相對(duì)離心力。影響分離因素的主要因素:離心力作為真實(shí)的力根本就不存在,在非慣性系中為計(jì)算方便假想的一個(gè)力。請(qǐng)看下面的說(shuō)明: 向心力使物體受到指向一個(gè)中心點(diǎn)的吸引、或推斥或任何傾向于該點(diǎn)的作用。 笛卡兒把離心力解釋為物體保持其“限定量”的一種趨勢(shì)。它們的區(qū)別就是,向心力是慣性參考系下的,而離心力是非慣性系中的力。我們處理物理題時(shí)都是在慣性系下(此時(shí)牛頓定律才成立),所以一般不用離心力這個(gè)概念。由于根本不是一個(gè)情況下的概念,我們無(wú)法對(duì)他們的方向和大小進(jìn)行比較。
相對(duì)離心力 Relative centrifugal force (RCF),RCF 就是實(shí)際離心力轉(zhuǎn)化為重力加速度的倍數(shù),g為重力加速度(9.80665m/s2),同為轉(zhuǎn)于旋轉(zhuǎn)一周等于2π弧度,因此轉(zhuǎn)子的角速度以每分鐘旋轉(zhuǎn)的次數(shù)(每分鐘轉(zhuǎn)數(shù)n或r/min)表示:一般情況下,低速離心時(shí)常以r/min來(lái)表示。
分離因素計(jì)算公式:RCF=F離心力/F重力= mω2r/mg= ω2r/g= (2*π*r/r*rpm) 2*r/g 注:rpm應(yīng)折換成轉(zhuǎn)/秒,例如:直徑1000mm,轉(zhuǎn)速1000轉(zhuǎn)/分的離心機(jī),分離因素為:RCF(1000)=(2*3.1415*16.667)^2*0.5/9.8,離心機(jī)可進(jìn)行液體澄清和固體顆粒富集,或液-液分離,這類(lèi)分離機(jī)有常壓、真空、冷凍條件下操作的不同結(jié)構(gòu)型式。離心機(jī)大量應(yīng)用于化工、石油、食品、制藥、選礦、煤炭、水處理和船舶等部門(mén)。離心機(jī)的技術(shù)指標(biāo)有很多,主要的是以下幾個(gè):離心力,轉(zhuǎn)速,容量,轉(zhuǎn)子型號(hào)等。
醫(yī)用冷凍離心機(jī)TDL5M的離心分離就是利用離心機(jī)轉(zhuǎn)子高速旋轉(zhuǎn)產(chǎn)生的強(qiáng)大的離心力,加快液體中顆粒的沉降速度,把樣品中不同沉降系數(shù)和浮力密度的物質(zhì)分離開(kāi)。離心力(F)的大小取決于離心轉(zhuǎn)頭的角速度r/min和物質(zhì)顆粒距離心軸的距離(rcm),它們的關(guān)系是:F=ˉ2 R。
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