峰面積是定量分析的基礎(chǔ)，峰面積的變化會導(dǎo)致精密度、標(biāo)曲、定量分析等一系列問題。

那么，如果遇到峰面積不穩(wěn)定的情況，我們要怎么辦？讓我們分三種情況分別來看一看：

一、峰面積變小

1. 儀器漏液

儀器漏液會導(dǎo)致樣品損失，與正常測定結(jié)果相比，會出現(xiàn)色譜峰減小的情況。

→這種時候，需要檢查系統(tǒng)壓力，確保所有螺絲或連接處無漏液情況，排查儀器方面的原因。

2. 樣品穩(wěn)定性不好

有些樣品自身穩(wěn)定性不好，配置后，隨著進(jìn)樣時間的推移會出現(xiàn)降解現(xiàn)象。

→如果連續(xù)進(jìn)樣過程中，主峰的峰面積減小，同時伴隨雜質(zhì)峰面積增加的情況，建議確認(rèn)樣品在溶劑或流動相中的穩(wěn)定性情況。

3. 進(jìn)樣瓶中樣品量過少

當(dāng)樣品瓶中樣品過少可能導(dǎo)致進(jìn)樣針未吸取到足夠樣品進(jìn)樣。

→添加樣品或使用內(nèi)襯管即可解決。

4. 針峰面積減小

進(jìn)樣瓶的瓶蓋擰緊后，瓶內(nèi)會出現(xiàn)負(fù)壓，可能導(dǎo)致進(jìn)樣器取樣不準(zhǔn)確。

→第二次進(jìn)樣時，由于瓶蓋已經(jīng)有孔，負(fù)壓消除后進(jìn)樣峰面積會恢復(fù)正常；也可通過使用預(yù)開口進(jìn)樣小瓶來解決該類問題。

二、峰面積變大

可能是由于色譜柱或流動相條件導(dǎo)致樣品吸附，特別是一些帶電荷情況較為復(fù)雜的蛋白或多肽類樣品。

→大濃度進(jìn)樣、平衡可能的吸附位點

→更換色譜柱或優(yōu)化方法

（推薦更換MG、MGII、或Proteonavi進(jìn)行嘗試）

▲CAPCELL PAK 聚合物包被結(jié)構(gòu)示意圖

Proteonavi

Proteonavi是采用在多孔球形硅膠填料表面鍵合丁基（C4）的高性能蛋白質(zhì)•多肽分析色譜柱。該填料既具有硅膠類填料的高分離能力和耐壓性，又具有耐酸性、抑制蛋白質(zhì)吸附等特長。

★ 具備*的耐酸性

★ 填料表面的蛋白吸附，即使樣品量少也能被檢出

★ 可對應(yīng)從分析到制備的規(guī)模擴大化

三、峰面積忽大忽小，變化無規(guī)律

1. 自動進(jìn)樣器故障或混入氣泡

→進(jìn)樣過程中，觀察進(jìn)樣針中無氣泡混入，如果自動進(jìn)樣器出現(xiàn)故障，需要咨詢相應(yīng)品牌儀器工程師。

2. 樣品過于黏稠會導(dǎo)致進(jìn)樣不準(zhǔn)確

→稀釋樣品通?？梢越鉀Q

3. 進(jìn)樣瓶中混入氣泡

→部分樣品容易混入氣泡，比如一些表面活性劑類樣品，觀察進(jìn)樣瓶中是否有小氣泡，或者對進(jìn)樣瓶進(jìn)行超聲脫氣。

PS: 以上對策主要針對液相分析檢測中出現(xiàn)峰面積不穩(wěn)的情況，如果在質(zhì)譜分析中出現(xiàn)峰面積不穩(wěn)，則可能會有離子化、基質(zhì)效應(yīng)等其他原因。