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中級(jí)會(huì)員 | 第10年

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正確的使用及保存血清

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1.使用前處理:大部分血清在使用前必須滅活處理,即56℃30分鐘。滅活的目的是去除血清中的補(bǔ)體成分,避免補(bǔ)體對細(xì)胞產(chǎn)生毒性作用。血清經(jīng)過滅活也會(huì)損失一些對細(xì)胞有利的成分,如生長因子,因此也有人提出血清不經(jīng)滅活直接用于培養(yǎng),這樣做的前提是確認(rèn)血清中不含補(bǔ)體成分。對于一些品質(zhì)高的胎牛血清和新牛血清可以考慮不經(jīng)滅活直接用于細(xì)胞培養(yǎng)。

2.儲(chǔ)存條件:血清一般儲(chǔ)存于-20℃,同時(shí)應(yīng)避免反復(fù)凍融。購買大包裝的血清后,首先要滅活處理,然后分裝成小包裝,儲(chǔ)存于-20℃,使用前融化。融化時(shí)現(xiàn)置于4℃。融化后的血清在4℃不宜長時(shí)間存放,應(yīng)盡快使用。

3.使用濃度:自從有了合成培養(yǎng)基,血清就是作為一種添加成分與合成培養(yǎng)基混合使用,使用濃度一般為5-20%,zui常用是10%。過多血清容易使培養(yǎng)中的細(xì)胞發(fā)生變化,特別是一些二倍體的無限細(xì)胞系,迅速生長之后容易發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化。

4.采購血清時(shí),先從供應(yīng)商處索取樣品進(jìn)行試驗(yàn),選定一批后就要保留足夠使用6個(gè)月至1年的量,直至用另一批經(jīng)過預(yù)先試驗(yàn)的樣品代替。

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