293來(lái)源病毒包裝細(xì)胞；ΦA圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 293來(lái)源病毒包裝細(xì)胞；ΦA圖片
形態(tài)特性  上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性   
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
傳代方法  1:2~1:3傳代。
傳代情況 C3
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）
STR  Amelogenin：X；CSF1PO：11，12；D13S317：11，12，13，14；D16S539：9，13；D18S51：17，18，19；D19S433：17，18；D21S11：27，28，30.2；D2S1338：19；D3S1358：15，16，17；D5S818：8，10；D7S820：11；D8S1179：12，15；FGA：23；TH01：7，9.3；TPOX：11；vWA：16，18，19，20；
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 B類
293來(lái)源病毒包裝細(xì)胞；ΦA圖片細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
293來(lái)源病毒包裝細(xì)胞；ΦA圖片質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
293來(lái)源病毒包裝細(xì)胞；ΦA圖片操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

JWH 015 (5 mg)JWH 015, (2-methyl-1-propyl-1H-indol-3-yl)-1-naphthalenyl-methanone
19-R)-hydroxy Prostaglandin A2 (5 mg)19(R)-hydroxy PGA2, 19-R)-hydroxy Prostaglandin A2, 9-oxo-15S,19R-dihydroxy-prosta-5Z,1,13E-trien-1-oic acid
Metformin (5 g)Biguanide|Cidophage|DMGG|Glucofine, Metformin, N,N-dimethyl-imidodicarbonimidic diamide
13,14-dehydro-15-cyclohexyl Carbaprostacyclin (1 mg)13,14-dehydro-15-cyclohexyl Carbaprostacyclin, 6,9.alpha.-methylene-11.alpha.-hydroxy-15,16,17,18,19,2-hexanor-14-(1-hydroxycyclohexyl)-prost-5E-en-13-yn-1-oic acid
PtdIns-(4,5)-P2 (1,2-dipalmitoyl) (ammonium salt) (5 mg)Phosphatidylinositol-4,5-diphosphate C-16|DPPI-4,5-P2, PtdIns-(4,5)-P2, 1-(1,2R-dihexadecanoylphosphatidyl)inositol-4,5-bisphosphate, triammonium salt
(R)-(-)-Eicosapentaenyl-2 -Hydroxy-1 -Propylamide (10 mg)(R)-(-)-Eicosapentaenyl-2 -Hydroxy-1 -Propylamide, (5Z,8Z,11Z,14Z,17Z)-N-((R)-2-hydroxypropyl)icosa-5,8,11,14,17-pentaenamide
酸銨（1KG）Ammonium Nitrate， CAS# 6484-52-2； ≥98%； HAZARDOUS MATERIAL
葉酸（5GM）Folic Acid， CAS# 59-30-3； MW 441.4； USP
肉蛋白胨（1KG）Meat Peptone， Peptic digest of animal tissue
無(wú)水磷酸氫二鈉（100GM）Sodium Phosphate， Dibasic， Anhydrous， ACS Grade； Cas# 7558-79-4； Formula: Na2HPO4； Formula Weight: 141.96羧肽酶 Y( 酵母 )    1mg
牛血清白蛋白    5g
葡聚糖凝膠 G-50 中顆粒    25g
多聚半乳糖醛酸鈉鹽    1g
葡聚糖凝膠 G-10    25g
瓊脂糖凝膠 2B    100mL
超氧化物歧化酶    10Ku
組蛋白    25g
核酸組蛋白 ( 小牛胸腺 )    250mg
透明質(zhì)酸鈉    1g
磷酸二酯酶Ⅱ    10U
中性蛋白酶    10mg
抑肽酶    2mg
牛肉蛋白胨    500g
蛋白胨    250g
酶水解酪素    100g
293來(lái)源病毒包裝細(xì)胞；ΦA圖片D- 半乳糖醛酸    1g
6- 磷酸葡萄糖鋇鹽    100mg
甲苯胺藍(lán)    5g
吡啰紅 G    5g
2,5- 二苯基惡唑    5g
傘形酮    5g
2,4- 二氯苯氧乙酸    5g