人肺成纖維細(xì)胞；HFL1*操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。

人肺成纖維細(xì)胞；HFL1*現(xiàn)貨直銷，免費(fèi)快遞送貨上門。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株，細(xì)胞系，種類齊全，現(xiàn)貨，質(zhì)量保證，公司所有產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細(xì)閱讀本說明書。

細(xì)胞名稱
形態(tài)特性  成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  
培養(yǎng)條件  F12K  優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%
傳代方法  消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。
傳代情況 P(10+5)
凍存條件  *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
運(yùn)輸保存：
采用干冰保存運(yùn)輸。收到細(xì)胞時(shí)，若干冰已經(jīng)*融化，請(qǐng)立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)；若尚留有干冰，請(qǐng)立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用，請(qǐng)按條件貯存細(xì)胞，切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。
保存條件：4℃保存一年;-20℃長(zhǎng)期保存
用途：只可用于科研。
儲(chǔ)存：液氮。
運(yùn)輸：干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。
細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基，這取決于細(xì)胞生長(zhǎng)的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一，周三，周五更換培養(yǎng)基。
注意：*次植入后，在6-16小時(shí)內(nèi)更換培養(yǎng)基，以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細(xì)胞。到達(dá)客戶手中，出現(xiàn)任何問題（人為或者非人為），導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。對(duì)于細(xì)胞的真實(shí)性，支持客戶檢測(cè)對(duì)應(yīng)的biomarker，（如證明細(xì)胞錯(cuò)誤，全額退款。）公司針對(duì)每株細(xì)胞，鑒定gene background，鑒定完成的細(xì)胞可以提供數(shù)據(jù)，用于證明細(xì)胞的真實(shí)性，并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧?xì)胞特性。

DpnI    500U
DTT，蛋白    5g
DTT，免稱量蛋白    48 管
dTTP 溶液，100mM    0.5mL
dTTP 溶液，2.5mM    2mL
dUTP 溶液，100mM     0.4mL
大腸桿菌 DNA 連接酶    1000U
大腸桿菌零誘導(dǎo)培養(yǎng)基    100mL
大片段 DNA 分子量標(biāo)準(zhǔn)    50μg
大鼠 NK 細(xì)胞分離液 1.068    200mL
大鼠白細(xì)胞分離液 1.084    200mL
大鼠單核細(xì)胞分離液 1.082    200mL
大鼠粒細(xì)胞分離液 1.119    200mL
大鼠淋巴細(xì)胞分離液 1.083    200mL
大鼠內(nèi)皮細(xì)胞分離液 1.066    200mL
大鼠胰島細(xì)胞分離液 1.063    200mL
大鼠中性粒細(xì)胞分離液 1.091    200mL
大鼠瘤細(xì)胞分離液 1.061    200mL
大提無內(nèi)毒素質(zhì)粒 DNAout    10 次
大提無內(nèi)毒素質(zhì)粒 DNAout    5次β-Nicotyrine （5 mg）NSC 127943|NSC 407276|α-Nicotyrine； 3-（1-methyl-1H-pyrrol-2-yl）-pyridine
AB-CHMINACA metabolite M4 （5 mg）1-（cyclohexylmethyl）-1H-indazole-3-carboxylic acid
CBL-018 （1 mg）naphthalen-1-yl 1-pentyl-1H-indole-3-carboxylate
X-Gal5-bromo-4-chloro-3-indolyl-β-D-Galactopyranoside； 5-bromo-4-chloro-1H-indol-3-yl-β-D-galactopyranoside
BVT 948 （10 mg）4-hydroxy-3,3-dimethyl-2H-benz[g]indole-2,5（3H）-dione
LY2811376（4S）-4-[2,4-difluoro-5-（5-pyrimidinyl）phenyl]-5,6-dihydro-4-methyl-4H-1,3-thiazin-2-amine
Tesaglitazar （10 mg）AZ 242|GalidaTM； （αS）-ethoxy-4-[2-[4-[（methylsulfonyl）oxy]phenyl]ethoxy]-benzenepropanoic acid
Clinafloxacin （hydrochloride） （250 mg）AM1091； 7-（3-ami-pyrrolidinyl）-8-chloro-1-cyclopropyl-6-fluoro-1,4-dihydro-4-oxo-3-quinolinecarboxylic acid
MCC-555 （5 mg）Isaglitazone|Netoglitazone|RWJ 241947； 5-[[6-[（2-fluorophenyl）methoxy]-2-naphthalenyl]methyl]-2,4-thiazolidinedione
Deltarasin （hydrochloride） （10 mg）2-[4-[（2S）-2-（2-phenyl-1H-benzimidazol-1-yl）-2-（4-piperidinyl）ethoxy]phenyl]-1-（phenylmethyl）-1H-benzimidazole, hydrochloride
Difenoxin （hydrochloride） （5 mg）Diphenoxylic Acid|R 15403； 1-（3-cyano-3,3-diphenylpropyl）-4-phenyl-4-piperidinecarboxylic acid, monohydrochloride
EC 23 （10 mg）AGN 190205|BASF 46928； 4-[2-（5,6,7,8-tetrahydro-5,5,8,8-tetramethyl-2-naphthalenyl）ethynyl]-benzoic acid
Δ8-THC CRM （2 mL）NSC 134453|Δ8-Tetrahydrocannabinol； 6aR,7,10,10aR-tetrahydro-6,6,9-trimethyl-3-pentyl-6H-dibenzo[b,d]pyran-1-ol