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人胚肺細(xì)胞VA13細(xì)胞;WI-38 VA13亞系2RA價格

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具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號

品       牌ATCC

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2017-01-05 08:44:43瀏覽次數(shù):438次

聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)
人胚肺細(xì)胞VA13細(xì)胞;WI-38 VA13亞系2RA價格售后:收到細(xì)胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r,應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報告并及時傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。

人胚肺細(xì)胞VA13細(xì)胞;WI-38 VA13亞系2RA價格質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。

人胚肺細(xì)胞VA13細(xì)胞;WI-38 VA13亞系2RA價格操作步驟:

1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。

【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性  成纖維細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細(xì)胞系衍生自WI-38細(xì)胞。WI-38細(xì)胞感染低滴度的SV40病毒,經(jīng)過連續(xù)傳代、克隆選擇獲得多株亞系,其中2RA亞系含有SV40 neo (T)和轉(zhuǎn)移抗原,從而改變其有限細(xì)胞系的特性,可在常規(guī)條件下連續(xù)傳代。該細(xì)胞系的實驗操作甚少在生物安全P2級條件下進(jìn)行。 
培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C265
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR  STR鑒定
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類

細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

谷胱甘肽過氧化物酶檢測試劑盒    100 次
谷胱甘肽還原酶檢測試劑盒    100 次 
谷胱甘肽瓊脂糖    2mL
谷胱甘肽一還原酶測試盒    50 T
骨骼肌細(xì)胞生長因子    5mL
鈷柱介質(zhì)    10mL
固藍(lán) BB 鹽    5g
固藍(lán) RR 鹽    5g
固綠    5g
固相 RNase 清除劑    100mL
固相 RNase 清除劑    250mL
固相內(nèi)毒素清除劑    100g
固相內(nèi)毒素清除劑    500g
硅基磁珠    2mL
硅膠膜 DNA 離心吸附柱 ( 大提 )    1套
硅膠膜離心吸附柱 ( 大提 ) 收集管    1只
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硅膠膜離心吸附柱系列 ( 小提 )    50 套
硅膠膜離心吸附柱再生液    500 次
鮭魚精 DNA    100mg5-fluoro SDB-005 (1 mg)naphthalen-1-yl 1-(5-fluoropentyl)-1H-indazole-3-carboxylate
ML-60218 (5 mg)2-chloro-N-[3-(5-chloro-3-methylbenzo[b]thien-2-yl)-1-methyl-1H-pyrazol-5-yl]-benzenesulfonamide
Lamotrigine (10 mg)BW 430C|Epilepax|LTG|Lamictal; 6-
Zidovudine (100 mg)AZT|Azidothymidine|NSC 602670|Retrovir|ZDV; 3’-
Diclazepam (5 mg)2’-Chlorodiazepam|Ro 5-3448; 7-chloro-5-(2-chlorophenyl)-1,3-dihydro-1-methyl-2H-1,4-benzodiazepin-2-one
Conoidin A (50 mg)2,3-bis(bromomethyl)-quinoxaline 1,4-dioxide
2C-T-2 (hydrochloride) (exempt preparation) (1 mg)2,5-Dimethoxy-4-ethylthiophenethylamine; 4-(ethylthio)-2,5-dimethoxy-benzeneethanamine, monohydrochloride
Ivabradine (hydrochloride) (50 mg)S 16257; 3-[3-[[[(7S)-3,4-dimethoxybicyclo[4.2.0]octa-1,3,5-trien-7-yl]methyl]methylamino]propyl]-1,3,4,5-tetrahydro-7,8-dimethoxy-2H-3-benzazepin-2-one, monohydrochloride
Edrophonium (chloride) (250 mg)Enlon|Tensilon; N-ethyl-3-hydroxy-N,N-dimethyl-benzenaminium, monochloride
MF498 (25 mg)N-[[[4-(5,9-diethoxy-6,8-dihydro-6-oxo-7H-pyrrolo[3,4-g]quinolin-7-yl)-3-methylphenyl]methyl]sulfonyl]-2-methoxy-benzeneacetamide
Zalcitabine (500 mg)2’,3’-Dideoxycytidine|Hivid|NSC 606170|Ro 24-2027/000|ddC; 2’,3’-dideoxy-cytidine
Cefpodoxime (free acid) (100 mg)R 3763; (6R)-7R-[[(2Z)-2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-(methoxyimino)acetyl]amino]-3-(methoxymethyl)-8-oxo-5-thia-1-azabicyclo[4.2.0]oct-2-ene-2-carboxylic acid
N-Acetyl-4-benzoquinone imine (5 mg)N-Acetyl-p-benzoquinonimine|NAPQI; N-(4-oxo-2,5-cyclohexadien-1-ylidene)-acetamide
鮭魚精 DNA 溶液    1mL
果膠    25g
果膠酶    100mg
果膠酶 Y-23    100mg
過硫酸銨    25g

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