EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KMY0907圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱(chēng) EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KMY0907圖片
形態(tài)特性  淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 懸浮生長(zhǎng)
特征特性  該細(xì)胞系來(lái)源于一無(wú)精癥男性患者的外周血。2009年由中科院昆明細(xì)胞庫(kù)通過(guò)EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立。 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)   15%NBS
傳代方法  1:2傳代；5-6天一次
傳代情況 P2
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 熒光法（-）
STR  -
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類(lèi)
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買(mǎi)到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以?xún)?nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

5-MAPB （hydrochloride） （10 mg）1-（benzofuran-5-yl）-N-methylpropan-2-amine， monohydrochloride； 5-（2-Methylaminopropyl）Benzofuran； 5-MAPB （hydrochloride）
5-methoxy-α-Ethyltryptamine （10 mg）α-ethyl-5-methoxy-1H-indole-3-ethanamine； 5-MeO-α-ET； 5-methoxy-α-Ethyltryptamine
JWH 146 （10 mg）（1-heptyl-5-phenyl-1H-pyrrol-3-yl）-1-naphthalenyl-methanone； JWH 146
Gatifloxacin （10 g）1-cyclopropyl-6-fluoro-1，4-dihydro-8-methoxy-7-（3-methyl-1-piperazinyl）-4-oxo-3-quinolinecarboxylic acid； AM 1155|BMS 206584-01|PD 135432； Gatifloxacin
JWH 081 N-（4-hydroxypentyl） metabolite （10 mg）（1-（4-hydroxypentyl）-1H-indol-3-yl）（4-methoxynaphthalen-1-yl）methanone； JWH 081 N-（4-hydroxypentyl） metabolite
5-（N-ethyl-N-isopropyl）-Amiloride （10 mg）3-amino-N-（aminoiminomethyl）-6-chloro-5-[ethyl（1-methylethyl）amino]-2-pyrazinecarboxamide； EPIA|L-593，754|MH 12-43； 5-（N-ethyl-N-isopropyl）-Amiloride
PJ-34 （hydrochloride） （1 mg）N-（5，6-dihydro-6-oxo-2-phenanthridinyl）-2-（dimethylamino）-acetamide， monohydrochloride； PJ-34 （hydrochloride）
JNJ-1661010 （25 mg）N-phenyl-4-（3-phenyl-1，2，4-thiadiazol-5-yl）-1-piperazinecarboxamide； JNJ-1661010Citrate Buffer(100x)/檸檬酸緩沖液(IHC抗原修復(fù)液, 100x)100ml國(guó)產(chǎn)
小鼠結(jié)締組織纖維細(xì)胞英文名稱(chēng)：LTK
786-O [786-0], 人腎透明腺細(xì)胞
人子宮內(nèi)膜腺細(xì)胞英文名稱(chēng)：HEC-1-B
BGS瓊脂/BGS Agar沙門(mén)氏菌分離培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
人腺細(xì)胞英文名稱(chēng)：MDA-MB-453
UM-UC-3(人膀胱移行細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
293(人胚腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
大鼠角膜上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
DNA酶瓊脂/脫氧核糖核酸酶瓊脂/Dnase Agar用于細(xì)菌DNA酶檢測(cè)100克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
人臍靜脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
UVM培養(yǎng)基/UVM Medium李氏菌的增菌培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
人肺上細(xì)胞英文名稱(chēng)：L132
煌綠糖膽鹽肉湯/BGLB肉湯/煌綠糖膽鹽增菌液/BGLB Broth用于水樣中大腸菌的檢測(cè)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
大鼠子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
皰肉培養(yǎng)基基礎(chǔ)/Cooked Meat Medium Base用于厭氧菌的分離培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
大鼠大隱靜脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
硝酸鹽氰化培養(yǎng)基基礎(chǔ)/KCN培養(yǎng)基基礎(chǔ)/Potassium Cyanide Medium Base用于鑒別腸道細(xì)菌KCN抑制試驗(yàn)100克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
SP Rabbit & Mouse HRP Kit(DAB)/兔&鼠通用型Streptavidin-HRP試劑盒(帶DAB顯色液)3ml、18ml國(guó)產(chǎn)
NCI-H596(人肺腺鱗細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1] (小鼠骨髓瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
L-O2(人正常肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
MDA-MB-231, 人腺細(xì)胞gersion
PPADS （sodium salt） （10 mg）4-[2-[4-formyl-5-hydroxy-6-methyl-3-[（phosphonooxy）methyl]-2-pyridinyl]diazenyl]-1，3-benzenedisulfonic acid， tetrasodium salt； Pyridoxalphosphate-6-azophenyl-2’，4’-disulfonic acid； PPADS （sodium salt）
Diazoxide （100 mg）7-chloro-3-methyl-1，1-dioxide-2H-1，2，4-benzothiadiazine； NSC 64198|NSC 76130|SRG 95213； Diazoxide