分泌抗豬SC蛋白單克隆抗體的雜交瘤細胞株；4H11圖片【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 分泌抗豬SC蛋白單克隆抗體的雜交瘤細胞株；4H11圖片
形態(tài)特性  淋巴母細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細胞屬專利保藏，其特征特性尚未公開。 
培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件  基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 未定
細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。   細胞到達客戶手中，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

Tricine 干粉，電泳     100g    
DNA 修復混合液     150 次    
131089-1    R- 藻紅蛋白標記親和素    1mg
90708-9    即用型高保真 PCR 試劑盒    9mL
脫氧膽酸    10g    
放線酮    100mg    
四甲基乙二胺    25mL    
T4 RNA 連接酶 2( 截短型 K227Q)    2000U    
CAS9087-70-1    抑肽酶    2mg
120514-20    即用型藍白 T 載體 D 型 ( 無啟動子，有 MCS)    20 次
苷脫氨酶    250U    
固藍 BB 鹽    5g    
固綠    5g    
接頭 DNA(Sal I-Sma I)    5nmol    
CAS9004-54-0    葡聚糖 T-2000    10g
12-131    Rosetta-gami(DE3)plysS 菌種    1mL
液相內(nèi)毒素清除劑    500 次    
JM109(DE3) 菌種    1mL    
L- 阿拉伯糖    10g    
DNA 包被溶液    100mL    
CAS636-00-0    6- 羥基多巴胺    5g
120701-10    鏈脲佐菌素溶液 ,10mg/mL    10mL
吲哚 -3-     1g    
聚乙二醇 6000    250g   KB(人口腔表樣細胞)5×106cells/瓶×2
HeLa/宮頸細胞株國產(chǎn)
中性蛋白酶(含10mL酶解緩沖液)1mL
Chang liver (CCL13) (人張氏肝細胞)5×106cells/瓶×2
小鼠角膜成纖維細胞*培養(yǎng)基100mL
5637, 人膀胱細胞
人子宮成纖維細胞*培養(yǎng)基100mL
改良番茄汁培養(yǎng)基/改良番茄汁瓊脂/Tomato Juice Agar Modified食品中酸菌總數(shù)測定250克國產(chǎn)/進口
NCI-H2170(人肺鱗細胞)5×106cells/瓶×2gersion
人支氣管成纖維細胞*培養(yǎng)基100mL
 細胞名稱
人胰腺上細胞*培養(yǎng)基100mL
EF-18瓊脂/EF-18 Agar濾膜法檢測食品中沙門氏菌250克國產(chǎn)/進口
人臍動脈內(nèi)細胞
VRBG瓊脂/結(jié)晶紫中性紅膽鹽葡萄糖瓊脂/VRBGA/Violet Red Bile Glucose Agar/VRBG Agar奶粉中坂崎桿菌的分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進口
人肺大動脈平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mL
假單胞F瓊脂/Pseudomonas Agar F銅綠（綠膿）假單胞菌色素生成試驗250克國產(chǎn)/進口
大鼠支氣管成纖維細胞*培養(yǎng)基100mL
葡萄球菌選擇性瓊脂/貝爾德-帕克瓊脂/Staphylococcus Selective Agar/Baird Parker Agar凝固酶陽生葡萄球菌的選擇性分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進口