非洲綠猴腎細(xì)胞（SV40轉(zhuǎn)化）；COS-1 [COS1]說(shuō)明書(shū)【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

細(xì)胞名稱(chēng) 非洲綠猴腎細(xì)胞（SV40轉(zhuǎn)化）；COS-1 [COS1]說(shuō)明書(shū)
形態(tài)特性  成纖維細(xì)胞
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  此細(xì)胞株源自CV-1細(xì)胞株，經(jīng)帶有編碼野生型T抗原的起始失活突變的SV40轉(zhuǎn)染得到。 這些細(xì)胞含有一個(gè)來(lái)自SV40基因組全部早期區(qū)域的組成型拷貝。 
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%
傳代方法  消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿(mǎn)。
傳代情況 PN5
凍存條件  *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測(cè) 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類(lèi)

非洲綠猴腎細(xì)胞（SV40轉(zhuǎn)化）；COS-1 [COS1]說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
非洲綠猴腎細(xì)胞（SV40轉(zhuǎn)化）；COS-1 [COS1]說(shuō)明書(shū)質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買(mǎi)到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以?xún)?nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶(hù)手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶(hù)提供一次。
非洲綠猴腎細(xì)胞（SV40轉(zhuǎn)化）；COS-1 [COS1]說(shuō)明書(shū)操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

人臍帶單核細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
rCSC, 大鼠心肌細(xì)胞 Rattus
強(qiáng)壯纖維單胞菌 Cellulomonas cartae
NCI-H2087(人非小細(xì)胞肺腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
米曲霉 Aspergillus oryzae
黑曲霉 Aspergillus niger
大鼠胰島素細(xì)胞英文名稱(chēng)：INS-1
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
MKN45(人胃細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
植物桿菌 Lactobacillus plantarum
不吸水鏈霉菌 Streptomyces ahygroscopicus
大鼠肝細(xì)胞瘤細(xì)胞英文名稱(chēng)：H-4-II-E
青春雙歧桿菌 Bifidobacterium adolensentis
黑曲霉 Aspergillus niger
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
PK-15(豬腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
桿菌屬 Lactobacillus sp.
菜豆根瘤菌 Mesorhizobium phaseoli
TM3(小鼠睪間質(zhì)細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis
土曲霉5g    甲基硫吡喃葡萄糖苷 (OTG)    
1000U    核酸內(nèi)切酶 IV    
5g    D- 甘露糖    
10mL    去垢劑去除樹(shù)脂    
堿性品紅    CAS58969-01-0    5g
超培養(yǎng)基    60404-100    100mL
5次    一站式大提柱式 miRNAout    
5mL    間充質(zhì)干細(xì)胞生長(zhǎng)因子 - 無(wú)血淸    
25g    L- 酪氨酸    
100 次    dNTP 和引物清除劑    
甲基纖維素    CAS9004-67-5    25g
谷胱甘肽瓊脂糖    120101-2    2mL
100 次    真細(xì)種屬鑒定 PCR Mix 2    
20只/袋    口腔拭子 ( 醫(yī)用簡(jiǎn)裝 )     
25g    硝酸銀    
10×100μL    AGL1 農(nóng)桿感受態(tài)細(xì)胞    
非洲綠猴腎細(xì)胞（SV40轉(zhuǎn)化）；COS-1 [COS1]說(shuō)明書(shū)核黃素    CAS83-88-5    25g
十二烷基磺酸清除劑    131051-25    25mL
50 次    柱式土壤 DNAout    
糞便 DNAout    70601-30    30 次
1mg    Rhod-2，三鹽    
100mL    DEPC 水